北京大学学报(医学版)
北京大學學報(醫學版)
북경대학학보(의학판)
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2011年
2期
204-208
,共5页
郑启军%汪欣%胡刚%万远廉%刘玉村%朱静
鄭啟軍%汪訢%鬍剛%萬遠廉%劉玉村%硃靜
정계군%왕흔%호강%만원렴%류옥촌%주정
黏着斑激酶2%结肠肿瘤%肝转移%超微结构
黏著斑激酶2%結腸腫瘤%肝轉移%超微結構
점착반격매2%결장종류%간전이%초미결구
目的:研究在裸鼠结肠癌肝转移模型中,富含脯氨酸的蛋白酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)对人结肠癌细胞肝转移能力和超微结构的影响.方法:利用正义及反义cDNA技术,在人结肠癌细胞系SW480基础上,构建Pyk2高表达的细胞系SW480-Pyk2+及低表达的细胞系SW480-Pyk2-作为实验组,并以转染空载体的细胞系SW480-vector和原细胞系SW480作为对照组.4组共32只4周龄的Babl/c nu/nu雄性裸鼠,用脾注射保留脾脏法构建裸鼠肝转移瘤模型.6周后处死裸鼠,用Western blot检测瘤细胞中Pyk2蛋白的表达,计数肝转移瘤数目,电子显微镜下观察肝转移瘤细胞的超微结构.结果:6周后裸鼠肝转移模型建立成功,Western blot显示SW480-Pyk2+组的蛋白表达量明显高于空载体组(SW480-vector)和SW480组,SW480-Pyk2-组的蛋白表达量明显低于SW480组和SW480-vector组;肝转移瘤计数显示SW480-Pyk2+组明显少于SW480-vector组及SW480组,SW480-Pyk2-组明显多于SW480-vector组及SW480组(P<0.05),而SW480-vector组与SW480组之间无明显差异;电子显微镜下观察发现,SW480-Pyk2+组细胞连接发育较成熟,有形成腺腔趋势,微绒毛较多,细胞器较多,粗面内质网较多,细胞异型性较轻;而SW480-Pyk2-组细胞连接发育不良,细胞器少,微绒毛短小而稀疏,细胞核异形明显,有核沟.结论:Pyk2能减少结肠癌肝转移灶的数量,改善细胞的异型性和细胞连接发育,并可能通过此机制抑制肿瘤转移.
目的:研究在裸鼠結腸癌肝轉移模型中,富含脯氨痠的蛋白酪氨痠激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)對人結腸癌細胞肝轉移能力和超微結構的影響.方法:利用正義及反義cDNA技術,在人結腸癌細胞繫SW480基礎上,構建Pyk2高錶達的細胞繫SW480-Pyk2+及低錶達的細胞繫SW480-Pyk2-作為實驗組,併以轉染空載體的細胞繫SW480-vector和原細胞繫SW480作為對照組.4組共32隻4週齡的Babl/c nu/nu雄性裸鼠,用脾註射保留脾髒法構建裸鼠肝轉移瘤模型.6週後處死裸鼠,用Western blot檢測瘤細胞中Pyk2蛋白的錶達,計數肝轉移瘤數目,電子顯微鏡下觀察肝轉移瘤細胞的超微結構.結果:6週後裸鼠肝轉移模型建立成功,Western blot顯示SW480-Pyk2+組的蛋白錶達量明顯高于空載體組(SW480-vector)和SW480組,SW480-Pyk2-組的蛋白錶達量明顯低于SW480組和SW480-vector組;肝轉移瘤計數顯示SW480-Pyk2+組明顯少于SW480-vector組及SW480組,SW480-Pyk2-組明顯多于SW480-vector組及SW480組(P<0.05),而SW480-vector組與SW480組之間無明顯差異;電子顯微鏡下觀察髮現,SW480-Pyk2+組細胞連接髮育較成熟,有形成腺腔趨勢,微絨毛較多,細胞器較多,粗麵內質網較多,細胞異型性較輕;而SW480-Pyk2-組細胞連接髮育不良,細胞器少,微絨毛短小而稀疏,細胞覈異形明顯,有覈溝.結論:Pyk2能減少結腸癌肝轉移竈的數量,改善細胞的異型性和細胞連接髮育,併可能通過此機製抑製腫瘤轉移.
목적:연구재라서결장암간전이모형중,부함포안산적단백락안산격매2(proline-rich tyrosine kinase 2,Pyk2)대인결장암세포간전이능력화초미결구적영향.방법:이용정의급반의cDNA기술,재인결장암세포계SW480기출상,구건Pyk2고표체적세포계SW480-Pyk2+급저표체적세포계SW480-Pyk2-작위실험조,병이전염공재체적세포계SW480-vector화원세포계SW480작위대조조.4조공32지4주령적Babl/c nu/nu웅성라서,용비주사보류비장법구건라서간전이류모형.6주후처사라서,용Western blot검측류세포중Pyk2단백적표체,계수간전이류수목,전자현미경하관찰간전이류세포적초미결구.결과:6주후라서간전이모형건립성공,Western blot현시SW480-Pyk2+조적단백표체량명현고우공재체조(SW480-vector)화SW480조,SW480-Pyk2-조적단백표체량명현저우SW480조화SW480-vector조;간전이류계수현시SW480-Pyk2+조명현소우SW480-vector조급SW480조,SW480-Pyk2-조명현다우SW480-vector조급SW480조(P<0.05),이SW480-vector조여SW480조지간무명현차이;전자현미경하관찰발현,SW480-Pyk2+조세포련접발육교성숙,유형성선강추세,미융모교다,세포기교다,조면내질망교다,세포이형성교경;이SW480-Pyk2-조세포련접발육불량,세포기소,미융모단소이희소,세포핵이형명현,유핵구.결론:Pyk2능감소결장암간전이조적수량,개선세포적이형성화세포련접발육,병가능통과차궤제억제종류전이.