CAJ | 학술논문

采用固相pH梯度SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,以小麦遗传型雄性不育系ms(S)-1376、杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系ms(A)- 1376,以及对应的保持系(A)-1376（杀雄剂诱导前的正常可育系）所构建的等基因和等生理差异系为试材,比较分析了2种分离纯化完整叶绿体的方法.在确立了一套适用的技术方法的基础上,研究了三者在花粉小孢子萌发单核早期小花完整叶绿体蛋白之间的差异.采用30％、45％和60％的不连续蔗糖密度梯度离心的方法能够获得完整且纯度较高的叶绿体,经TCA-丙酮提取蛋白质后,PDQuest软件分析,在分子量14.4-66.2 kD,等电点4～7的线性范围内可分辨出2-DE图谱上239个较为清晰的蛋白质点,对其中的6个差异表达蛋白质点进行MALDI-TOF肽质量指纹图谱分析,从生物信息学数据库检索鉴定出6个差异蛋白质点分别是酰基辅酶A脱氢酶结构域蛋白、钙调结合蛋白磷酸酶、多催化功能肽酶、热休克蛋白60、光受体蛋白2及1个未知功能的表达蛋白质.这些蛋白质在供试小麦叶绿体物质能量代谢、叶绿体防卫抵御机制、叶绿体细胞内信号转导及植物极性生长等生理应答反应中起调控作用,它们能在本研究供试两不育系和对应可育系中差异表达,可能与雄性不育相关.
채용고상pH제도SDS취병희선알쌍향응효전영기술,이소맥유전형웅성불육계ms(S)-1376、살웅제SQ-1유도적생리형웅성불육계ms(A)- 1376,이급대응적보지계(A)-1376（살웅제유도전적정상가육계）소구건적등기인화등생리차이계위시재,비교분석료2충분리순화완정협록체적방법.재학립료일투괄용적기술방법적기출상,연구료삼자재화분소포자맹발단핵조기소화완정협록체단백지간적차이.채용30％、45％화60％적불련속자당밀도제도리심적방법능구획득완정차순도교고적협록체,경TCA-병동제취단백질후,PDQuest연건분석,재분자량14.4-66.2 kD,등전점4～7적선성범위내가분변출2-DE도보상239개교위청석적단백질점,대기중적6개차이표체단백질점진행MALDI-TOF태질량지문도보분석,종생물신식학수거고검색감정출6개차이단백질점분별시선기보매A탈경매결구역단백、개조결합단백린산매、다최화공능태매、열휴극단백60、광수체단백2급1개미지공능적표체단백질.저사단백질재공시소맥협록체물질능량대사、협록체방위저어궤제、협록체세포내신호전도급식물겁성생장등생리응답반응중기조공작용,타문능재본연구공시량불육계화대응가육계중차이표체,가능여웅성불육상관.