中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
40期
7437-7440
,共4页
王存邦%白海%葸瑞%张茜%周进茂%赵强%潘耀柱
王存邦%白海%葸瑞%張茜%週進茂%趙彊%潘耀柱
왕존방%백해%사서%장천%주진무%조강%반요주
小鼠%骨髓细胞%细胞因子%反转录病毒载体%基因转移%绿色荧光蛋白%NeoR基因
小鼠%骨髓細胞%細胞因子%反轉錄病毒載體%基因轉移%綠色熒光蛋白%NeoR基因
소서%골수세포%세포인자%반전록병독재체%기인전이%록색형광단백%NeoR기인
背景:为方便、准确检测外源细胞在体内的存活情况,需在外源细胞转移标记基因.目的:观察多种细胞因子联合刺激下反转录病毒载体对BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓细胞基因转移效率的影响.方法:以PA317-GCGPXSN细胞制备病毒上清,NIH3T3细胞测定病毒滴度后,取经过干细胞因子、白细胞介素3、白细胞介素6预培养刺激后的BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓细胞,实验组实施基因转移,流式细胞仪及PCR方法测定基因转移效率.阴性对照组不做基因转移.阳性对照组为PA317-GCGPXSN细胞株.结果与结论:①病毒滴度为1.9×108 CFU/L.②对照组BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓细胞测定的荧光强度数值为0.63%,实验组为76.04%,两组相比差异有显著性意义(P < 0.01).PCR方法扩增到了NeoR基因的特异性片断,结果证实细胞因子预刺激后实施基因转移,可有效地将外源基因转移进入BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓细胞基因组中.
揹景:為方便、準確檢測外源細胞在體內的存活情況,需在外源細胞轉移標記基因.目的:觀察多種細胞因子聯閤刺激下反轉錄病毒載體對BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓細胞基因轉移效率的影響.方法:以PA317-GCGPXSN細胞製備病毒上清,NIH3T3細胞測定病毒滴度後,取經過榦細胞因子、白細胞介素3、白細胞介素6預培養刺激後的BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓細胞,實驗組實施基因轉移,流式細胞儀及PCR方法測定基因轉移效率.陰性對照組不做基因轉移.暘性對照組為PA317-GCGPXSN細胞株.結果與結論:①病毒滴度為1.9×108 CFU/L.②對照組BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓細胞測定的熒光彊度數值為0.63%,實驗組為76.04%,兩組相比差異有顯著性意義(P < 0.01).PCR方法擴增到瞭NeoR基因的特異性片斷,結果證實細胞因子預刺激後實施基因轉移,可有效地將外源基因轉移進入BALB/C×C57BL F1代小鼠骨髓細胞基因組中.
배경:위방편、준학검측외원세포재체내적존활정황,수재외원세포전이표기기인.목적:관찰다충세포인자연합자격하반전록병독재체대BALB/C×C57BL F1대소서골수세포기인전이효솔적영향.방법:이PA317-GCGPXSN세포제비병독상청,NIH3T3세포측정병독적도후,취경과간세포인자、백세포개소3、백세포개소6예배양자격후적BALB/C×C57BL F1대소서골수세포,실험조실시기인전이,류식세포의급PCR방법측정기인전이효솔.음성대조조불주기인전이.양성대조조위PA317-GCGPXSN세포주.결과여결론:①병독적도위1.9×108 CFU/L.②대조조BALB/C×C57BL F1대소서골수세포측정적형광강도수치위0.63%,실험조위76.04%,량조상비차이유현저성의의(P < 0.01).PCR방법확증도료NeoR기인적특이성편단,결과증실세포인자예자격후실시기인전이,가유효지장외원기인전이진입BALB/C×C57BL F1대소서골수세포기인조중.
