CAJ | 학술논문

目的紧密连接蛋白(claudin)-7在结肠癌中表达上调,并与肿瘤的发生转移密切相关.文中探讨CpG甲基转移酶(CpG methyltransferase)又称M.SssI在体外对人结肠癌细胞HT-29细胞的凋亡诱导和增殖的抑制作用及对紧密连接蛋白-7表达的影响.方法分别用50U/ml M.SssI为过甲基化组,10μmol/L氮杂胞苷(5-azacytidine)为甲基化酶抑制组干预培养HT-29细胞,只加PBS为对照组.24h后用流式细胞术观察3组细胞的凋亡情况.应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测各组细胞的增殖能力.用细胞免疫荧光技术观察紧密连接蛋白-7的细胞学定位和表达程度在3组细胞中的差异.结果过甲基化组细胞早期凋亡率明显高于PBS对照组,P<0.05,而甲基化酶抑制组早期凋亡率低于对照组,差异无统计学意义,P>0.05.M.SssI显著抑制HT-29细胞增殖,P<0.05,抑制率达32.1%,而甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷可促进细胞增殖,但与对照组比较差异无统计学意义,P>0.05.与对照组和甲基化酶抑制组相比,紧密连接蛋白-7在过甲基化组表达明显下降,P<0.05,而5-氮杂胞苷组中紧密连接蛋白-7的表达量较对照组表达明显增强,P<0.05.结论 CpG甲基转移酶可诱导HT-29细胞的凋亡、抑制增殖,可能与CpG甲基转移酶促使紧密连接蛋白-7基因启动子发生过甲基化,导致相应蛋白表达下降有关.
목적 긴밀련접단백(claudin)-7재결장암중표체상조,병여종류적발생전이밀절상관.문중탐토CpG갑기전이매(CpG methyltransferase)우칭M.SssI재체외대인결장암세포HT-29세포적조망유도화증식적억제작용급대긴밀련접단백-7표체적영향.방법 분별용50U/ml M.SssI위과갑기화조,10μmol/L담잡포감(5-azacytidine)위갑기화매억제조간예배양HT-29세포,지가PBS위대조조.24h후용류식세포술관찰3조세포적조망정황.응용사갑기우담서람(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)비색법검측각조세포적증식능력.용세포면역형광기술관찰긴밀련접단백-7적세포학정위화표체정도재3조세포중적차이.결과 과갑기화조세포조기조망솔명현고우PBS대조조,P<0.05,이갑기화매억제조조기조망솔저우대조조,차이무통계학의의,P>0.05.M.SssI현저억제HT-29세포증식,P<0.05,억제솔체32.1%,이갑기화매억제제5-담잡포감가촉진세포증식,단여대조조비교차이무통계학의의,P>0.05.여대조조화갑기화매억제조상비,긴밀련접단백-7재과갑기화조표체명현하강,P<0.05,이5-담잡포감조중긴밀련접단백-7적표체량교대조조표체명현증강,P<0.05.결론 CpG갑기전이매가유도HT-29세포적조망、억제증식,가능여CpG갑기전이매촉사긴밀련접단백-7기인계동자발생과갑기화,도치상응단백표체하강유관.