中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2003年
3期
179-181
,共3页
周建娅%毛国根%唐法娣%周建英
週建婭%毛國根%唐法娣%週建英
주건아%모국근%당법제%주건영
二氧化硅%核因子-κB%THP-1细胞株
二氧化硅%覈因子-κB%THP-1細胞株
이양화규%핵인자-κB%THP-1세포주
目的探讨矽肺发病过程中SiO2诱导对人单核细胞株THP-1核因子-κB(NF-κB)活化的影响.方法采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜(LSCM,Zeiss 510)检测THP-1细胞NF-κB p65亚基(NF-κB/p65)定位;Western-blot法测定THP-1细胞核蛋白中NF-κB/p65水平.结果免疫荧光分析显示,异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB/p65在胞浆区为绿色荧光,而进入了丙亚基碘(PI)红色荧光标记的胞核区时则红绿两色叠加成黄色荧光.正常细胞NF-κB/p65主要分布于胞浆区,核区很少,而100μg/ml SiO2刺激30 min后NF-κB/p65荧光标记集聚于核区,胞浆区少见.Western-blot结果显示,对照组(0μg/ml SiO2)THP-1细胞核蛋白中有低水平NF-κB/p65表达;100μg/ml和200μg/mlSiO2作用15 min和30 min,THP-1细胞核蛋白中NF-κB/p65表达增加,并随着剂量的增加和时间的延长,NF-κB/p65水平相对增加.NF-κB/p65激活剂脂多糖(LPS)处理的THP-1细胞NF-κB/p65定位情况和核蛋白水平与上述结果相似.结论SiO2刺激可引起THP-1单核细胞NF-κB核转位活化.
目的探討矽肺髮病過程中SiO2誘導對人單覈細胞株THP-1覈因子-κB(NF-κB)活化的影響.方法採用間接免疫熒光細胞化學法結閤激光共聚焦顯微鏡(LSCM,Zeiss 510)檢測THP-1細胞NF-κB p65亞基(NF-κB/p65)定位;Western-blot法測定THP-1細胞覈蛋白中NF-κB/p65水平.結果免疫熒光分析顯示,異硫氰痠熒光素(FITC)標記的NF-κB/p65在胞漿區為綠色熒光,而進入瞭丙亞基碘(PI)紅色熒光標記的胞覈區時則紅綠兩色疊加成黃色熒光.正常細胞NF-κB/p65主要分佈于胞漿區,覈區很少,而100μg/ml SiO2刺激30 min後NF-κB/p65熒光標記集聚于覈區,胞漿區少見.Western-blot結果顯示,對照組(0μg/ml SiO2)THP-1細胞覈蛋白中有低水平NF-κB/p65錶達;100μg/ml和200μg/mlSiO2作用15 min和30 min,THP-1細胞覈蛋白中NF-κB/p65錶達增加,併隨著劑量的增加和時間的延長,NF-κB/p65水平相對增加.NF-κB/p65激活劑脂多糖(LPS)處理的THP-1細胞NF-κB/p65定位情況和覈蛋白水平與上述結果相似.結論SiO2刺激可引起THP-1單覈細胞NF-κB覈轉位活化.
목적탐토석폐발병과정중SiO2유도대인단핵세포주THP-1핵인자-κB(NF-κB)활화적영향.방법채용간접면역형광세포화학법결합격광공취초현미경(LSCM,Zeiss 510)검측THP-1세포NF-κB p65아기(NF-κB/p65)정위;Western-blot법측정THP-1세포핵단백중NF-κB/p65수평.결과면역형광분석현시,이류청산형광소(FITC)표기적NF-κB/p65재포장구위록색형광,이진입료병아기전(PI)홍색형광표기적포핵구시칙홍록량색첩가성황색형광.정상세포NF-κB/p65주요분포우포장구,핵구흔소,이100μg/ml SiO2자격30 min후NF-κB/p65형광표기집취우핵구,포장구소견.Western-blot결과현시,대조조(0μg/ml SiO2)THP-1세포핵단백중유저수평NF-κB/p65표체;100μg/ml화200μg/mlSiO2작용15 min화30 min,THP-1세포핵단백중NF-κB/p65표체증가,병수착제량적증가화시간적연장,NF-κB/p65수평상대증가.NF-κB/p65격활제지다당(LPS)처리적THP-1세포NF-κB/p65정위정황화핵단백수평여상술결과상사.결론SiO2자격가인기THP-1단핵세포NF-κB핵전위활화.
