CAJ | 학술논문

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响极其可能机制.方法采集SD大鼠骨髓,分离出MSCs,并培养、纯化,取传至第6代的MSCs,移植前1 d以5溴2脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记,然后用显微注射器将其缓慢注射到脊髓损伤大鼠模型(成年SD大鼠)的受损脊髓中心,以不进行移植的脊髓损伤大鼠模型(损伤组)和假手术组为对照.术后进行运动功能评分以判断神经功能恢复情况,并切取移植区域脊髓组织,应用荧光免疫化学染色检测脊髓损伤灶边周的神经元凋亡情况(TUNEI.与NeuN双标记)以及移植的MSCs的分布和向神经元分化情况(Brdu与NeuN双标记),应用逆转录聚合酶链反应检测损伤灶区域脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA的表达.结果移植后第3天开始,损伤组和移植组大鼠的BBB运动功能评分明显上升,第14天后进入平台期,但移植组各时间点的.BBB运动功能评分均明显高于损伤组(P<0.05).移植后3 d,在移植组的脊髓组织中可见Brdu标记阳性细胞,少部分Brdu标记阳性细胞同时表达神经元特异性标志物NeuN;移植后第3、7天,损伤组和移植组脊髓组织中的凋亡神经元均显著多于假手术组(P<0.01),凋亡的神经元多存在于损伤周边区,但移植组的凋亡神经元显著少于损伤组(P<0.01);移植后第3、7天,假手术组未检测到BDNF mRNA的表达,损伤组和移植组均可检测到BDNF mRNA的表达,移植组的表达量分别较损伤组高28.6%和39.2%(P<0.05).结论移植的骨髓MSCs可促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复,其机制除MSCs直接分化为神经元进行修复外,还可能与其改善脊髓损伤区的微环境、上调BDNF、mRNA表达、减少神经细胞凋亡有关.
목적 탐토골수간충질간세포(MSCs)이식대척수손상대서신경공능회복적영향겁기가능궤제.방법 채집SD대서골수,분리출MSCs,병배양、순화,취전지제6대적MSCs,이식전1 d이5추2탈양뇨밀정핵감(Brdu)표기,연후용현미주사기장기완만주사도척수손상대서모형(성년SD대서)적수손척수중심,이불진행이식적척수손상대서모형(손상조)화가수술조위대조.술후진행운동공능평분이판단신경공능회복정황,병절취이식구역척수조직,응용형광면역화학염색검측척수손상조변주적신경원조망정황(TUNEI.여NeuN쌍표기)이급이식적MSCs적분포화향신경원분화정황(Brdu여NeuN쌍표기),응용역전록취합매련반응검측손상조구역뇌원성신경영양인자(BDNF)mRNA적표체.결과 이식후제3천개시,손상조화이식조대서적BBB운동공능평분명현상승,제14천후진입평태기,단이식조각시간점적.BBB운동공능평분균명현고우손상조(P<0.05).이식후3 d,재이식조적척수조직중가견Brdu표기양성세포,소부분Brdu표기양성세포동시표체신경원특이성표지물NeuN;이식후제3、7천,손상조화이식조척수조직중적조망신경원균현저다우가수술조(P<0.01),조망적신경원다존재우손상주변구,단이식조적조망신경원현저소우손상조(P<0.01);이식후제3、7천,가수술조미검측도BDNF mRNA적표체,손상조화이식조균가검측도BDNF mRNA적표체,이식조적표체량분별교손상조고28.6%화39.2%(P<0.05).결론 이식적골수MSCs가촉진척수손상대서신경공능적회복,기궤제제MSCs직접분화위신경원진행수복외,환가능여기개선척수손상구적미배경、상조BDNF、mRNA표체、감소신경세포조망유관.