CAJ | 학술논문

目的探讨胃癌组织中是否存在胃泌素/胆囊收缩素(CCK)-B受体自分泌环及其在胃癌的发生发展中的作用.方法采用人胃癌细胞系SGC-7901在含10%新生小牛血清RPMI-1640培养基中培养于37℃、5%CO2的培养箱中.SGC-7901细胞中胃泌素/CCK-B受体自分泌环的检测分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学及放射免疫分析法.抗胃泌素单克隆抗体阻断自分泌环对细胞生长与凋亡的影响采用SGC-7901细胞与不同浓度的抗胃泌素单克隆抗体共同孵育72 h后,搜集细胞,分别用四甲基偶氮唑盐比色法及流式细胞术检测细胞生长率、细胞周期及凋亡细胞,以不加抗体孵育作为阴性对照.结果 SGC-7901细胞复合表达CCK-B受体和胃泌素基因,其序列已被测序证实.胃泌素蛋白主要在SGC-7901细胞的胞质中表达,且培养液中的胃泌素浓度随培养时间的延长和细胞数的增加而增加.用抗胃泌素单克隆抗体阻断此自分泌环后,细胞的生长率从正常对照的100%降至31.4%(抗体浓度为2μg/ml),而S期细胞数从正常对照的27.8%降至9.5%(抗体浓度为1.2μg/ml),且细胞凋亡率分别从正常对照的0.9%(亚G1峰法)和1.1%(膜联蛋白-V/碘化丙啶双染法)升至6.5%(亚G1峰法)和7.5%(膜联蛋白-V/碘化丙啶双染法).结论胃癌细胞系SGC-7901中存在胃泌素/CCK-B受体自分泌环,阻断此自分泌环后能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
목적 탐토위암조직중시부존재위비소/담낭수축소(CCK)-B수체자분비배급기재위암적발생발전중적작용.방법 채용인위암세포계SGC-7901재함10%신생소우혈청RPMI-1640배양기중배양우37℃、5%CO2적배양상중.SGC-7901세포중위비소/CCK-B수체자분비배적검측분별용역전록-취합매련반응(RT-PCR)、면역세포화학급방사면역분석법.항위비소단극륭항체조단자분비배대세포생장여조망적영향채용SGC-7901세포여불동농도적항위비소단극륭항체공동부육72 h후,수집세포,분별용사갑기우담서염비색법급류식세포술검측세포생장솔、세포주기급조망세포,이불가항체부육작위음성대조.결과 SGC-7901세포복합표체CCK-B수체화위비소기인,기서렬이피측서증실.위비소단백주요재SGC-7901세포적포질중표체,차배양액중적위비소농도수배양시간적연장화세포수적증가이증가.용항위비소단극륭항체조단차자분비배후,세포적생장솔종정상대조적100%강지31.4%(항체농도위2μg/ml),이S기세포수종정상대조적27.8%강지9.5%(항체농도위1.2μg/ml),차세포조망솔분별종정상대조적0.9%(아G1봉법)화1.1%(막련단백-V/전화병정쌍염법)승지6.5%(아G1봉법)화7.5%(막련단백-V/전화병정쌍염법).결론 위암세포계SGC-7901중존재위비소/CCK-B수체자분비배,조단차자분비배후능억제세포증식,촉진세포조망.