检验检疫科学
檢驗檢疫科學
검험검역과학
INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE
2004年
z1期
42-44
,共3页
林石明%陈青%李燕%陈毓荃%郑国华%明艳林
林石明%陳青%李燕%陳毓荃%鄭國華%明豔林
림석명%진청%리연%진육전%정국화%명염림
LSV%RT-PCR%Dig-cDNA探针%斑点杂交%检测
LSV%RT-PCR%Dig-cDNA探針%斑點雜交%檢測
LSV%RT-PCR%Dig-cDNA탐침%반점잡교%검측
根据百合无症病毒(LSV)的核苷酸序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR技术扩增得到了一条与目的片段大小一致的条带;进一步克隆测序表明,该序列与已知的LSV序列有96%的同源性.用随机引物法合成地高辛标记的cDNA探针,建立了核酸斑点杂交检测体系.本研究分别建立了用于LSV的特异性的高灵敏度RT-PCR检测体系(其检测灵敏度为1.4ng/叶片)和适合大通量检测的Dig-cDNA(地高辛标记)核酸斑点杂交检测体系(其检测灵敏度为20μg/叶片).
根據百閤無癥病毒(LSV)的覈苷痠序列設計一對特異性引物,利用RT-PCR技術擴增得到瞭一條與目的片段大小一緻的條帶;進一步剋隆測序錶明,該序列與已知的LSV序列有96%的同源性.用隨機引物法閤成地高辛標記的cDNA探針,建立瞭覈痠斑點雜交檢測體繫.本研究分彆建立瞭用于LSV的特異性的高靈敏度RT-PCR檢測體繫(其檢測靈敏度為1.4ng/葉片)和適閤大通量檢測的Dig-cDNA(地高辛標記)覈痠斑點雜交檢測體繫(其檢測靈敏度為20μg/葉片).
근거백합무증병독(LSV)적핵감산서렬설계일대특이성인물,이용RT-PCR기술확증득도료일조여목적편단대소일치적조대;진일보극륭측서표명,해서렬여이지적LSV서렬유96%적동원성.용수궤인물법합성지고신표기적cDNA탐침,건립료핵산반점잡교검측체계.본연구분별건립료용우LSV적특이성적고령민도RT-PCR검측체계(기검측령민도위1.4ng/협편)화괄합대통량검측적Dig-cDNA(지고신표기)핵산반점잡교검측체계(기검측령민도위20μg/협편).
