微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2006年
3期
9-12
,共4页
范行良%邢宇坤%李长贵%王剑锋
範行良%邢宇坤%李長貴%王劍鋒
범행량%형우곤%리장귀%왕검봉
巨细胞病毒%结构蛋白%免疫性
巨細胞病毒%結構蛋白%免疫性
거세포병독%결구단백%면역성
应用聚合酶链式反应(PCR)扩增HCMV结构蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048和p38aa117～aa373基因片段,将其分别克隆于表达载体pGEX-4T-1和pET30a-SetB中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,重组质粒经酶切鉴定及DNA测序证实pGEX-4T-1/ p150aa595～aa614/aa1006～aa1048和pET30a-SetB/ p38aa117～aa373构建正确;通过优化表达和纯化,分别获得分子量约为35kD和43kD纯化的表达产物.经亲和层析纯化以免疫印迹实验对纯化的重组蛋白进行免疫反应性检测,证实重组蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373能够与抗HCMV IgM阳性血清反应,说明表达的重组蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373具有良好的免疫性,对HCMV的原发感染具有潜在的应用价值.
應用聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增HCMV結構蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048和p38aa117～aa373基因片段,將其分彆剋隆于錶達載體pGEX-4T-1和pET30a-SetB中,轉化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導錶達,重組質粒經酶切鑒定及DNA測序證實pGEX-4T-1/ p150aa595～aa614/aa1006～aa1048和pET30a-SetB/ p38aa117～aa373構建正確;通過優化錶達和純化,分彆穫得分子量約為35kD和43kD純化的錶達產物.經親和層析純化以免疫印跡實驗對純化的重組蛋白進行免疫反應性檢測,證實重組蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373能夠與抗HCMV IgM暘性血清反應,說明錶達的重組蛋白p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373具有良好的免疫性,對HCMV的原髮感染具有潛在的應用價值.
응용취합매련식반응(PCR)확증HCMV결구단백p150aa595～aa614/aa1006～aa1048화p38aa117～aa373기인편단,장기분별극륭우표체재체pGEX-4T-1화pET30a-SetB중,전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도표체,중조질립경매절감정급DNA측서증실pGEX-4T-1/ p150aa595～aa614/aa1006～aa1048화pET30a-SetB/ p38aa117～aa373구건정학;통과우화표체화순화,분별획득분자량약위35kD화43kD순화적표체산물.경친화층석순화이면역인적실험대순화적중조단백진행면역반응성검측,증실중조단백p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373능구여항HCMV IgM양성혈청반응,설명표체적중조단백p150aa595～aa614/aa1006～aa1048、p38aa117～aa373구유량호적면역성,대HCMV적원발감염구유잠재적응용개치.
