动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2007年
8期
21-26
,共6页
李超然%别克·吐尔逊%蔡宏%朱玉贤
李超然%彆剋·吐爾遜%蔡宏%硃玉賢
리초연%별극·토이손%채굉%주옥현
牛结核病%间接酶联免疫吸附试验%CFP-10%ESAT-6
牛結覈病%間接酶聯免疫吸附試驗%CFP-10%ESAT-6
우결핵병%간접매련면역흡부시험%CFP-10%ESAT-6
低分子质量的蛋白抗原CFP-10是一种重要的牛分支杆菌早期分泌蛋白.为了检测该蛋白和其他几种抗原在牛结核病诊断中的临床应用,对CFP-10的基因进行克隆,鉴定,并在原核系统中表达.PCR法扩增cfp-10基因片段,连接到pET-22b(+)原核表达载体中,再转入表达宿主E.coli BL21(DE3)PlysS菌株内,用IPTG诱导,进行蛋白表达、纯化.分别以CFP-10、ESAT-6、MPT83、MPT70、牛PPD、CFP-10与ESAT-6混合蛋白,MPT83与MPT70混合蛋白为抗原,用间接ELISA法诊断牛结核病.结果表明,以CFP-10与ESAT-6混合蛋白作为抗原检测牛结核病的特异性和敏感性分别达到了100%和63.6%,均超过了其他单抗原或抗原组合,为以筛选合适抗原为基础的血清学诊断技术提供了有力的支持并创造了良好的应用前景.
低分子質量的蛋白抗原CFP-10是一種重要的牛分支桿菌早期分泌蛋白.為瞭檢測該蛋白和其他幾種抗原在牛結覈病診斷中的臨床應用,對CFP-10的基因進行剋隆,鑒定,併在原覈繫統中錶達.PCR法擴增cfp-10基因片段,連接到pET-22b(+)原覈錶達載體中,再轉入錶達宿主E.coli BL21(DE3)PlysS菌株內,用IPTG誘導,進行蛋白錶達、純化.分彆以CFP-10、ESAT-6、MPT83、MPT70、牛PPD、CFP-10與ESAT-6混閤蛋白,MPT83與MPT70混閤蛋白為抗原,用間接ELISA法診斷牛結覈病.結果錶明,以CFP-10與ESAT-6混閤蛋白作為抗原檢測牛結覈病的特異性和敏感性分彆達到瞭100%和63.6%,均超過瞭其他單抗原或抗原組閤,為以篩選閤適抗原為基礎的血清學診斷技術提供瞭有力的支持併創造瞭良好的應用前景.
저분자질량적단백항원CFP-10시일충중요적우분지간균조기분비단백.위료검측해단백화기타궤충항원재우결핵병진단중적림상응용,대CFP-10적기인진행극륭,감정,병재원핵계통중표체.PCR법확증cfp-10기인편단,련접도pET-22b(+)원핵표체재체중,재전입표체숙주E.coli BL21(DE3)PlysS균주내,용IPTG유도,진행단백표체、순화.분별이CFP-10、ESAT-6、MPT83、MPT70、우PPD、CFP-10여ESAT-6혼합단백,MPT83여MPT70혼합단백위항원,용간접ELISA법진단우결핵병.결과표명,이CFP-10여ESAT-6혼합단백작위항원검측우결핵병적특이성화민감성분별체도료100%화63.6%,균초과료기타단항원혹항원조합,위이사선합괄항원위기출적혈청학진단기술제공료유력적지지병창조료량호적응용전경.