CAJ | 학술논문

目的:采用不同培养基和饲养层培养人胚胎干细胞H1,建立适合H1细胞增殖的最佳条件并分析其基本生物学特性.方法:鼠源性饲养层采用ICR品系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),人源性饲养层采用人胚胎成纤维细胞系(HFF-1).H1基本培养基配制分别采用传统DMEM/F12和改良培养基Knock-outTM DMEM.实验共分为MEF+DMEM/F12、MEF+K-DMEM、HFF+DMEM/F12、HFF+K-DMEM组.H1基本生物学特性检测采用免疫荧光、RT-PCR、碱性磷酸酶和核型分析.结果:MEF+DMEM/F12组中H1克隆形态规则,不发生分化,增殖速度快;而MEF+K-DMEM组细胞克隆传代后第4日发生分化;HFF+DMEM/F12组和HFF+K-DMEM组细胞传代后第3日就显示出分化趋势,克隆变扁.MEF+DMEM/F12组中H1细胞保持正常核型和基本生物学特性.结论:不同的人胚胎干细胞系最佳培养条件是不同的,建立的MEF+DMEM/F12组培养条件最适合H1细胞增殖.
목적:채용불동배양기화사양층배양인배태간세포H1,건립괄합H1세포증식적최가조건병분석기기본생물학특성.방법:서원성사양층채용ICR품계소서배태성섬유세포(MEF),인원성사양층채용인배태성섬유세포계(HFF-1).H1기본배양기배제분별채용전통DMEM/F12화개량배양기Knock-outTM DMEM.실험공분위MEF+DMEM/F12、MEF+K-DMEM、HFF+DMEM/F12、HFF+K-DMEM조.H1기본생물학특성검측채용면역형광、RT-PCR、감성린산매화핵형분석.결과:MEF+DMEM/F12조중H1극륭형태규칙,불발생분화,증식속도쾌;이MEF+K-DMEM조세포극륭전대후제4일발생분화;HFF+DMEM/F12조화HFF+K-DMEM조세포전대후제3일취현시출분화추세,극륭변편.MEF+DMEM/F12조중H1세포보지정상핵형화기본생물학특성.결론:불동적인배태간세포계최가배양조건시불동적,건립적MEF+DMEM/F12조배양조건최괄합H1세포증식.