中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2008年
24期
2406-2409
,共4页
刘居理%傅玉才%许铭炎%许锦阶
劉居理%傅玉纔%許銘炎%許錦階
류거리%부옥재%허명염%허금계
LASS1%酵母双杂交%诱饵蛋白
LASS1%酵母雙雜交%誘餌蛋白
LASS1%효모쌍잡교%유이단백
目的 构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础.方法 应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检测重组质粒的自激活现象及毒性.利用Western印迹检测重组质粒在AH109的表达情况.结果 LASS1基因的PCR产物片段大小分别为Flag(111 bp)、Slag(109 bp);Western印迹结果表明2个重组质粒表达的蛋白均可以与抗c-Myc抗体在22 kU处特异性反应;重组质粒转化酵母后无自激活作用.结论 重组质粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能够在AH109内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用.
目的 構建酵母雙雜交繫統誘餌蛋白大鼠LASS1融閤錶達質粒,為進一步篩選大鼠腦神經元內與LASS1p相互作用的蛋白奠定基礎.方法 應用PCR方法穫得大鼠LASS1基因2箇片段,分彆剋隆入酵母雙雜交繫統誘餌蛋白質粒載體pGBKT7,轉染酵母菌AH109併檢測重組質粒的自激活現象及毒性.利用Western印跡檢測重組質粒在AH109的錶達情況.結果 LASS1基因的PCR產物片段大小分彆為Flag(111 bp)、Slag(109 bp);Western印跡結果錶明2箇重組質粒錶達的蛋白均可以與抗c-Myc抗體在22 kU處特異性反應;重組質粒轉化酵母後無自激活作用.結論 重組質粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能夠在AH109內正確錶達,可作為酵母雙雜交繫統誘餌蛋白使用.
목적 구건효모쌍잡교계통유이단백대서LASS1융합표체질립,위진일보사선대서뇌신경원내여LASS1p상호작용적단백전정기출.방법 응용PCR방법획득대서LASS1기인2개편단,분별극륭입효모쌍잡교계통유이단백질립재체pGBKT7,전염효모균AH109병검측중조질립적자격활현상급독성.이용Western인적검측중조질립재AH109적표체정황.결과 LASS1기인적PCR산물편단대소분별위Flag(111 bp)、Slag(109 bp);Western인적결과표명2개중조질립표체적단백균가이여항c-Myc항체재22 kU처특이성반응;중조질립전화효모후무자격활작용.결론 중조질립pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag균능구재AH109내정학표체,가작위효모쌍잡교계통유이단백사용.
