激光生物学报
激光生物學報
격광생물학보
ACTA LASER BIOLOGY SINICA
2010年
2期
224-228
,共5页
屠小菊%汪启明%李秀山%邓克勤%唐东英%罗泽宇%赵小英%刘选明
屠小菊%汪啟明%李秀山%鄧剋勤%唐東英%囉澤宇%趙小英%劉選明
도소국%왕계명%리수산%산극근%당동영%라택우%조소영%류선명
DBB1a%原核表达%蛋白纯化%Western blotting
DBB1a%原覈錶達%蛋白純化%Western blotting
DBB1a%원핵표체%단백순화%Western blotting
PCR扩增拟南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守区段(GenBank登录号:AT2G21320),转化到冷诱导表达载体pCold TF上,构建pCold-DBB1a重组质粒,转化大肠杆菌DH5a.15℃下IPTG诱导表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE检测.证实目的蛋白以可溶形式在约20 kD处高效表达,与预期蛋白大小相吻合.表达蛋白经Ni琼脂糖凝胶亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western blotting检测证实纯化后获得高纯度融合蛋白,这为进一步研究DBB1a功能奠定了基础.
PCR擴增擬南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守區段(GenBank登錄號:AT2G21320),轉化到冷誘導錶達載體pCold TF上,構建pCold-DBB1a重組質粒,轉化大腸桿菌DH5a.15℃下IPTG誘導錶達融閤蛋白,併通過SDS-PAGE檢測.證實目的蛋白以可溶形式在約20 kD處高效錶達,與預期蛋白大小相吻閤.錶達蛋白經Ni瓊脂糖凝膠親和層析純化,SDS-PAGE及Western blotting檢測證實純化後穫得高純度融閤蛋白,這為進一步研究DBB1a功能奠定瞭基礎.
PCR확증의남개(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA적보수구단(GenBank등록호:AT2G21320),전화도랭유도표체재체pCold TF상,구건pCold-DBB1a중조질립,전화대장간균DH5a.15℃하IPTG유도표체융합단백,병통과SDS-PAGE검측.증실목적단백이가용형식재약20 kD처고효표체,여예기단백대소상문합.표체단백경Ni경지당응효친화층석순화,SDS-PAGE급Western blotting검측증실순화후획득고순도융합단백,저위진일보연구DBB1a공능전정료기출.
