CAJ | 학술논문

目的:研究体外使用音猬因子(SHH)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化人牙髓干细胞向神经细胞分化的诱导条件.方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液 ,有限稀释法培养分离的原代人牙髓干细胞,并进行克隆化培养,检测间充质干细胞特异性标志物STRO-1的表达.将人牙髓干细胞分别接种于含有不同浓度诱导液,MTT法检测不同时间、两种因子单独或联合对细胞增殖能力的影;免疫荧光法检测抗微管相关蛋白(MAP- 2)、神经元烯醇化酶(NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.透射电镜观察诱导前后细胞超微结构.结果:克隆来源细胞的间充质干细胞特异性标志物STRO-1表达阳性.100 μg/L音猬因子SHH与20 μg/L碱性成纤维生长因子bFGF单独作用促增殖作用最强(P<0.05),碱性成纤维生长因子bFGF单独作用各组及对照组均未检测出神经元样细胞.音猬因子SHH作用各组检测到阳性细胞.而100 μg/L音猬因子SHH与20 μg/L碱性成纤维生长因子bFGF联合增殖和分化作用均优于其它组.透射电镜观察到神经元样细胞表现.结论:100 μg/L音猬因子和20 μg/L碱性成纤维生长因子联合可以在体外有效诱导人牙髓干细胞分化为神经细胞.
목적:연구체외사용음위인자(SHH)、감성성섬유생장인자(bFGF)체외유도인아수간세포(DPSCs)분화위신경세포적가행성,이우화인아수간세포향신경세포분화적유도조건.방법:종인정기혹조생발제적제일전마아혹제삼마아중제취아수,채용매소화급과려법득도단세포현액 ,유한희석법배양분리적원대인아수간세포,병진행극륭화배양,검측간충질간세포특이성표지물STRO-1적표체.장인아수간세포분별접충우함유불동농도유도액,MTT법검측불동시간、량충인자단독혹연합대세포증식능력적영;면역형광법검측항미관상관단백(MAP- 2)、신경원희순화매(NSE)、효질원섬유산성단백(GFAP)적표체.투사전경관찰유도전후세포초미결구.결과:극륭래원세포적간충질간세포특이성표지물STRO-1표체양성.100 μg/L음위인자SHH여20 μg/L감성성섬유생장인자bFGF단독작용촉증식작용최강(P<0.05),감성성섬유생장인자bFGF단독작용각조급대조조균미검측출신경원양세포.음위인자SHH작용각조검측도양성세포.이100 μg/L음위인자SHH여20 μg/L감성성섬유생장인자bFGF연합증식화분화작용균우우기타조.투사전경관찰도신경원양세포표현.결론:100 μg/L음위인자화20 μg/L감성성섬유생장인자연합가이재체외유효유도인아수간세포분화위신경세포.