CAJ | 학술논문

目的:探讨肝癌Hep3B细胞白细胞抗原-G(HLA-G)过表达对NK细胞体外杀伤作用的影响.方法:实验分为正常对照组(无干预措施,Hep3B组)、空载体对照组(转染空质粒,Hep3B-GFP组)和实验组(转染pEGFP-C1-HLA-G质粒,Hep3B-HLA-G组).构建HLA-G真核表达质粒,转染至Hep3B细胞,经G418筛选,建立稳定过表达HLA-G的肝癌Hep3B细胞.Real-time PCR及Western blotting检测肝癌Hep3B细胞HLA-G mRNA及蛋白质水平的表达.分析肝癌Hep3B细胞HLA-G过表达及HLA-ABC抗体封闭靶细胞相应位点对NK细胞体外杀伤作用的影响.结果:经酶切及测序鉴定证实,插入序列与设计的序列相符.Real-time PCR和Western blotting结果均表明,转染重组质粒的Hep3B细胞HLA-G过表达(P<0.01).NK细胞对转染pEGFP-C1-HLA-G的Hep3B细胞杀伤作用明显降低(P<0.01),HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对Hep3B、Hep3B-GFP和Hep3B HLA-G细胞的杀伤均增加(P<0.01).结论:pEGFP-C1-HLA-G表达载体可有效增加HLA-G表达,HLA-G过表达可以削弱NK细胞对肝癌细胞的杀伤效应.HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对靶细胞的杀伤能力普遍有所提高.
목적:탐토간암Hep3B세포백세포항원-G(HLA-G)과표체대NK세포체외살상작용적영향.방법:실험분위정상대조조(무간예조시,Hep3B조)、공재체대조조(전염공질립,Hep3B-GFP조)화실험조(전염pEGFP-C1-HLA-G질립,Hep3B-HLA-G조).구건HLA-G진핵표체질립,전염지Hep3B세포,경G418사선,건립은정과표체HLA-G적간암Hep3B세포.Real-time PCR급Western blotting검측간암Hep3B세포HLA-G mRNA급단백질수평적표체.분석간암Hep3B세포HLA-G과표체급HLA-ABC항체봉폐파세포상응위점대NK세포체외살상작용적영향.결과:경매절급측서감정증실,삽입서렬여설계적서렬상부.Real-time PCR화Western blotting결과균표명,전염중조질립적Hep3B세포HLA-G과표체(P<0.01).NK세포대전염pEGFP-C1-HLA-G적Hep3B세포살상작용명현강저(P<0.01),HLA-ABC단항봉폐파세포상응위점후,NK세포대Hep3B、Hep3B-GFP화Hep3B HLA-G세포적살상균증가(P<0.01).결론:pEGFP-C1-HLA-G표체재체가유효증가HLA-G표체,HLA-G과표체가이삭약NK세포대간암세포적살상효응.HLA-ABC단항봉폐파세포상응위점후,NK세포대파세포적살상능력보편유소제고.