CAJ | 학술논문

为了研究不同时间段细胞MHC分子表达的变化情况,从分子水平上说明E2基因与NHC之间的关系.本研究克隆了中国猪瘟病毒强毒石门毒株E2基因,构建了pcDNA 3.0真核表达质粒P-E2基因.限制性内切酶进行双酶切和序列分析鉴定E2基因插入位置、方向和读码框架的正确性.构建成功的真核表达质粒P-E2,用脂质体转染方法瞬时转染进行体外细胞表达,转染后24、48h后用Western-blot和间接免疫荧光技术检测P-E2基因质粒在PK-15细胞内的表达情况.结果表明:用His抗体进行间接免疫荧光检测发现E2基因得到表达,并定位于细胞浆,同时Western-blot检测后发现重组质粒P-E2转染后也在PK-15细胞中得到了表达.为进一步研究猪瘟病毒与宿主细胞之间的关系,病毒的致病机理提供了基础材料.
위료연구불동시간단세포MHC분자표체적변화정황,종분자수평상설명E2기인여NHC지간적관계.본연구극륭료중국저온병독강독석문독주E2기인,구건료pcDNA 3.0진핵표체질립P-E2기인.한제성내절매진행쌍매절화서렬분석감정E2기인삽입위치、방향화독마광가적정학성.구건성공적진핵표체질립P-E2,용지질체전염방법순시전염진행체외세포표체,전염후24、48h후용Western-blot화간접면역형광기술검측P-E2기인질립재PK-15세포내적표체정황.결과표명:용His항체진행간접면역형광검측발현E2기인득도표체,병정위우세포장,동시Western-blot검측후발현중조질립P-E2전염후야재PK-15세포중득도료표체.위진일보연구저온병독여숙주세포지간적관계,병독적치병궤리제공료기출재료.