中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2005年
1期
4-8
,共5页
朱晓华%石佑恩%胡萍%宁长修%朱红刚
硃曉華%石祐恩%鬍萍%寧長脩%硃紅剛
주효화%석우은%호평%저장수%주홍강
日本血吸虫%脂肪酸结合蛋白%核酸疫苗%真核表达%免疫保护性
日本血吸蟲%脂肪痠結閤蛋白%覈痠疫苗%真覈錶達%免疫保護性
일본혈흡충%지방산결합단백%핵산역묘%진핵표체%면역보호성
目的构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14FABP)重组质粒,并观察其在小鼠体内诱导的抗日本血吸虫感染保护作用.方法RT-PCR特异性扩增Sj14FABP基因,将其克隆入真核表达载体pVIVO2,通过PCR、双酶切及测序鉴定.获得的重组质粒pVIVO2-Sj14FABP转染HepG2细胞,间接免疫荧光(IFA)检测蛋白表达;并免疫BALB/c小鼠,30 d后攻击感染,感染后45天剖杀,计数检获成虫数和肝脏虫卵数.结果RT-PCR扩增出大小为440 bp的Sj14FABP片段,重组质粒经PCR和双酶切后均获得目的片段,转染细胞IFA结果显示有较强荧光.重组质粒免疫小鼠后分别获得24.1%减虫率和27.2%减卵率.结论成功构建和表达重组质粒pVIVO2-Sj14FABP,该核酸疫苗能够诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力.
目的構建日本血吸蟲脂肪痠結閤蛋白(Sj14FABP)重組質粒,併觀察其在小鼠體內誘導的抗日本血吸蟲感染保護作用.方法RT-PCR特異性擴增Sj14FABP基因,將其剋隆入真覈錶達載體pVIVO2,通過PCR、雙酶切及測序鑒定.穫得的重組質粒pVIVO2-Sj14FABP轉染HepG2細胞,間接免疫熒光(IFA)檢測蛋白錶達;併免疫BALB/c小鼠,30 d後攻擊感染,感染後45天剖殺,計數檢穫成蟲數和肝髒蟲卵數.結果RT-PCR擴增齣大小為440 bp的Sj14FABP片段,重組質粒經PCR和雙酶切後均穫得目的片段,轉染細胞IFA結果顯示有較彊熒光.重組質粒免疫小鼠後分彆穫得24.1%減蟲率和27.2%減卵率.結論成功構建和錶達重組質粒pVIVO2-Sj14FABP,該覈痠疫苗能夠誘導小鼠產生部分抗血吸蟲感染的保護力.
목적구건일본혈흡충지방산결합단백(Sj14FABP)중조질립,병관찰기재소서체내유도적항일본혈흡충감염보호작용.방법RT-PCR특이성확증Sj14FABP기인,장기극륭입진핵표체재체pVIVO2,통과PCR、쌍매절급측서감정.획득적중조질립pVIVO2-Sj14FABP전염HepG2세포,간접면역형광(IFA)검측단백표체;병면역BALB/c소서,30 d후공격감염,감염후45천부살,계수검획성충수화간장충란수.결과RT-PCR확증출대소위440 bp적Sj14FABP편단,중조질립경PCR화쌍매절후균획득목적편단,전염세포IFA결과현시유교강형광.중조질립면역소서후분별획득24.1%감충솔화27.2%감란솔.결론성공구건화표체중조질립pVIVO2-Sj14FABP,해핵산역묘능구유도소서산생부분항혈흡충감염적보호력.
