中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2006年
4期
726-730
,共5页
付劲蓉%陈惠芹%张绪超%黄绍良%周敦华%黄科
付勁蓉%陳惠芹%張緒超%黃紹良%週敦華%黃科
부경용%진혜근%장서초%황소량%주돈화%황과
AGM区%胎肝%基质细胞%抑制消减杂交%基因芯片
AGM區%胎肝%基質細胞%抑製消減雜交%基因芯片
AGM구%태간%기질세포%억제소감잡교%기인심편
为了筛选在主动脉-性腺-中肾(AGM)区基质细胞中差异表达的基因,以药物流产的孕30-35天的人胚胎AGM区来源基质细胞为"实验方",以源自意外而致流产的孕4-5月的水囊引产的胎儿肝组织的基质细胞为"驱动方",建立了在人AGM区基质细胞中差异表达基因的消减杂交文库.进一步用基因芯片技术对所建立的抑制消减杂交文库进行筛选,并挑选其中明显差异表达的18个克隆进行序列测定和同源性分析.结果表明: 在所构建的AGM抑制消减杂交文库中,经过PCR鉴定有特异性扩增带且扩增带分子量在200-700 bp的克隆有211个,阳性率高达76.4%.经过基因芯片筛选,挑选出ratio值大于5的克隆共18个进行序列测定显示,在测序的18个明显差异表达的阳性克隆中,4个为未知基因,14个为已知基因,其中这些已知基因分别参与了细胞迁移、分化、生长、细胞周期、信号转导及血管发生等细胞重要生命过程. 这些基因大多数在胚胎分化造血发育中的作用尚未见报道. 结论筛选AGM区基质细胞中差异表达的基因为进一步研究胚胎造血发育的分化调控的分子机理提供了必要的理论基础.
為瞭篩選在主動脈-性腺-中腎(AGM)區基質細胞中差異錶達的基因,以藥物流產的孕30-35天的人胚胎AGM區來源基質細胞為"實驗方",以源自意外而緻流產的孕4-5月的水囊引產的胎兒肝組織的基質細胞為"驅動方",建立瞭在人AGM區基質細胞中差異錶達基因的消減雜交文庫.進一步用基因芯片技術對所建立的抑製消減雜交文庫進行篩選,併挑選其中明顯差異錶達的18箇剋隆進行序列測定和同源性分析.結果錶明: 在所構建的AGM抑製消減雜交文庫中,經過PCR鑒定有特異性擴增帶且擴增帶分子量在200-700 bp的剋隆有211箇,暘性率高達76.4%.經過基因芯片篩選,挑選齣ratio值大于5的剋隆共18箇進行序列測定顯示,在測序的18箇明顯差異錶達的暘性剋隆中,4箇為未知基因,14箇為已知基因,其中這些已知基因分彆參與瞭細胞遷移、分化、生長、細胞週期、信號轉導及血管髮生等細胞重要生命過程. 這些基因大多數在胚胎分化造血髮育中的作用尚未見報道. 結論篩選AGM區基質細胞中差異錶達的基因為進一步研究胚胎造血髮育的分化調控的分子機理提供瞭必要的理論基礎.
위료사선재주동맥-성선-중신(AGM)구기질세포중차이표체적기인,이약물유산적잉30-35천적인배태AGM구래원기질세포위"실험방",이원자의외이치유산적잉4-5월적수낭인산적태인간조직적기질세포위"구동방",건립료재인AGM구기질세포중차이표체기인적소감잡교문고.진일보용기인심편기술대소건립적억제소감잡교문고진행사선,병도선기중명현차이표체적18개극륭진행서렬측정화동원성분석.결과표명: 재소구건적AGM억제소감잡교문고중,경과PCR감정유특이성확증대차확증대분자량재200-700 bp적극륭유211개,양성솔고체76.4%.경과기인심편사선,도선출ratio치대우5적극륭공18개진행서렬측정현시,재측서적18개명현차이표체적양성극륭중,4개위미지기인,14개위이지기인,기중저사이지기인분별삼여료세포천이、분화、생장、세포주기、신호전도급혈관발생등세포중요생명과정. 저사기인대다수재배태분화조혈발육중적작용상미견보도. 결론사선AGM구기질세포중차이표체적기인위진일보연구배태조혈발육적분화조공적분자궤리제공료필요적이론기출.