CAJ | 학술논문

目的:端粒酶活性表达可能是干细胞维持其自我复制能力的分子基础,然而对于这种酶活性表达在骨髓基质细胞端粒维持和细胞增殖中的作用及其随年龄增长的变化规律还知之甚少.观察不同年龄大鼠骨髓基质细胞端粒酶活性和端粒长度的变化情况.方法:实验于2005-10/2006-08在解放军163医院神经外科实验室进行.①实验材料:清洁级SD大鼠,雌雄不拘,体质量120～150 g,购自中南大学湘雅医学院实验动物中心.根据大鼠年龄不同分为1月龄组、3月龄组、6月龄组、1年龄组、2年龄组.②实验方法:采用密度梯度离心法分离培养不同年龄大鼠骨髓基质细胞,观察各组细胞形态学差别,采用MTT法绘制细胞生长曲线.③实验评估:采用流式细胞仪检测细胞周期,PCR-ELISA法检测各组细胞端粒酶活性,Southern印迹法测量各组细胞端粒末端限制性片段长度.结果:①不同年龄各组骨髓基质细胞形态上无明显差别.②各组细胞增殖缓慢,不同年龄组大鼠骨髓基质细胞生长周期显示,G0/G1期细胞多,G2/M期和S期细胞较少.各组间无明显差别.③1月至2年组大鼠骨髓基质细胞端粒酶活性分别为0.651、0.676、0.615、0.815、0.672,各组间差异无显著性意义.④1月至2年组大鼠细胞端粒末端限制性片断长度分别为24.4、22.56、23.56、22.79、22.65 kb.除1月组稍长于其他各组外,其余各组间端粒末端限制性片断长度无明显差别.结论:①随着年龄的增长,骨髓基质细胞稳定表达端粒酶活性.②骨髓基质细胞能维持端粒长度,不随年龄增长而缩短,这可能与细胞表达端粒酶活性有关.
목적:단립매활성표체가능시간세포유지기자아복제능력적분자기출,연이대우저충매활성표체재골수기질세포단립유지화세포증식중적작용급기수년령증장적변화규률환지지심소.관찰불동년령대서골수기질세포단립매활성화단립장도적변화정황.방법:실험우2005-10/2006-08재해방군163의원신경외과실험실진행.①실험재료:청길급SD대서,자웅불구,체질량120～150 g,구자중남대학상아의학원실험동물중심.근거대서년령불동분위1월령조、3월령조、6월령조、1년령조、2년령조.②실험방법:채용밀도제도리심법분리배양불동년령대서골수기질세포,관찰각조세포형태학차별,채용MTT법회제세포생장곡선.③실험평고:채용류식세포의검측세포주기,PCR-ELISA법검측각조세포단립매활성,Southern인적법측량각조세포단립말단한제성편단장도.결과:①불동년령각조골수기질세포형태상무명현차별.②각조세포증식완만,불동년령조대서골수기질세포생장주기현시,G0/G1기세포다,G2/M기화S기세포교소.각조간무명현차별.③1월지2년조대서골수기질세포단립매활성분별위0.651、0.676、0.615、0.815、0.672,각조간차이무현저성의의.④1월지2년조대서세포단립말단한제성편단장도분별위24.4、22.56、23.56、22.79、22.65 kb.제1월조초장우기타각조외,기여각조간단립말단한제성편단장도무명현차별.결론:①수착년령적증장,골수기질세포은정표체단립매활성.②골수기질세포능유지단립장도,불수년령증장이축단,저가능여세포표체단립매활성유관.