生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
6期
130-137
,共8页
野生毛木耳%ISSR-PCR%单因子试验%体系优化
野生毛木耳%ISSR-PCR%單因子試驗%體繫優化
야생모목이%ISSR-PCR%단인자시험%체계우화
为获得条带清晰,重复性好,多态性高的野生毛木耳ISSR扩增结果,通过单因子试验对ISSR-PCR反应条件进行了优化.确定了ISSR分析的最佳PCR条件:25 μL 反应体系中模板DNA 25 ng、dNTPs 0.24 mmol/L、Taq DNA 聚合酶1 U、Mg2+0.9 mmol/L、引物2 μmol/L、10× PCR buffer 2.5 μL、ddH2O 12.6 μL.最佳退火温度因不同的引物而定,最佳循环次数为35次.在此基础上初步筛选出25条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.这一优化体系的建立为进一步利用ISSR标记技术进行野生毛木耳种质鉴定及遗传多样性分析提供了一个适合的程序.
為穫得條帶清晰,重複性好,多態性高的野生毛木耳ISSR擴增結果,通過單因子試驗對ISSR-PCR反應條件進行瞭優化.確定瞭ISSR分析的最佳PCR條件:25 μL 反應體繫中模闆DNA 25 ng、dNTPs 0.24 mmol/L、Taq DNA 聚閤酶1 U、Mg2+0.9 mmol/L、引物2 μmol/L、10× PCR buffer 2.5 μL、ddH2O 12.6 μL.最佳退火溫度因不同的引物而定,最佳循環次數為35次.在此基礎上初步篩選齣25條擴增穩定、多態性豐富的ISSR引物.這一優化體繫的建立為進一步利用ISSR標記技術進行野生毛木耳種質鑒定及遺傳多樣性分析提供瞭一箇適閤的程序.
위획득조대청석,중복성호,다태성고적야생모목이ISSR확증결과,통과단인자시험대ISSR-PCR반응조건진행료우화.학정료ISSR분석적최가PCR조건:25 μL 반응체계중모판DNA 25 ng、dNTPs 0.24 mmol/L、Taq DNA 취합매1 U、Mg2+0.9 mmol/L、인물2 μmol/L、10× PCR buffer 2.5 μL、ddH2O 12.6 μL.최가퇴화온도인불동적인물이정,최가순배차수위35차.재차기출상초보사선출25조확증은정、다태성봉부적ISSR인물.저일우화체계적건립위진일보이용ISSR표기기술진행야생모목이충질감정급유전다양성분석제공료일개괄합적정서.
