农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2010年
6期
1149-1155
,共7页
黄潘%龚炎长%彭秀丽%李世军%杨宇%王晓%俸艳萍
黃潘%龔炎長%彭秀麗%李世軍%楊宇%王曉%俸豔萍
황반%공염장%팽수려%리세군%양우%왕효%봉염평
鸡%miRNA%性腺发育%RNA加尾以及引物延伸
鷄%miRNA%性腺髮育%RNA加尾以及引物延伸
계%miRNA%성선발육%RNA가미이급인물연신
为研究microRNA(miRNA)在鸡胚早期性分化过程中的表达,探讨miRNA在性腺早期发育中的作用,本研究从前期以3.5~6.5 d的雌、雄鸡(Gallus gallus)胚胎性腺为材料的miRNA芯片表达谱中筛选出6个性别差异表达的miRNAs(其中miR-551b和miR-612为鸡新miRNAs),采用RNA加尾以及引物延伸的半定量RT-PCR方法研究这些差异表达miRNAs在3.5~6.5 d雌、雄鸡胚性腺中的表达,并验证其中新miRNAs的茎环前体结构.RNA folding软件折叠结果表明,预测的鸡miR-612和miR-551b均具有茎环状的前体结构.半定量结果表明,这6个miRNAs均存在不同程度的性别差异表达.除4.5 d外,gga-miR-612和gga-miR-1456在其它检测时期的表达为雌性高于雄性;在4.5~6.5 d鸡胚性腺中,gga-miR-551b在雄性中表达显著高于雌性(P<0.05);gga-miR-126在3.5和6.5 d雌性性腺中的表达低于雄性,而4.5和5.5 d则相反;gga-miR-1599在所检测时期中均为雄性中高表达且在4.5 d达极显著水平(P<0.01),gga-miR-10b的表达与之相反.根据表达谱结果推测gga-miR-551b以及gga-miR-1599可能涉及早期鸡胚性腺发育过程.
為研究microRNA(miRNA)在鷄胚早期性分化過程中的錶達,探討miRNA在性腺早期髮育中的作用,本研究從前期以3.5~6.5 d的雌、雄鷄(Gallus gallus)胚胎性腺為材料的miRNA芯片錶達譜中篩選齣6箇性彆差異錶達的miRNAs(其中miR-551b和miR-612為鷄新miRNAs),採用RNA加尾以及引物延伸的半定量RT-PCR方法研究這些差異錶達miRNAs在3.5~6.5 d雌、雄鷄胚性腺中的錶達,併驗證其中新miRNAs的莖環前體結構.RNA folding軟件摺疊結果錶明,預測的鷄miR-612和miR-551b均具有莖環狀的前體結構.半定量結果錶明,這6箇miRNAs均存在不同程度的性彆差異錶達.除4.5 d外,gga-miR-612和gga-miR-1456在其它檢測時期的錶達為雌性高于雄性;在4.5~6.5 d鷄胚性腺中,gga-miR-551b在雄性中錶達顯著高于雌性(P<0.05);gga-miR-126在3.5和6.5 d雌性性腺中的錶達低于雄性,而4.5和5.5 d則相反;gga-miR-1599在所檢測時期中均為雄性中高錶達且在4.5 d達極顯著水平(P<0.01),gga-miR-10b的錶達與之相反.根據錶達譜結果推測gga-miR-551b以及gga-miR-1599可能涉及早期鷄胚性腺髮育過程.
위연구microRNA(miRNA)재계배조기성분화과정중적표체,탐토miRNA재성선조기발육중적작용,본연구종전기이3.5~6.5 d적자、웅계(Gallus gallus)배태성선위재료적miRNA심편표체보중사선출6개성별차이표체적miRNAs(기중miR-551b화miR-612위계신miRNAs),채용RNA가미이급인물연신적반정량RT-PCR방법연구저사차이표체miRNAs재3.5~6.5 d자、웅계배성선중적표체,병험증기중신miRNAs적경배전체결구.RNA folding연건절첩결과표명,예측적계miR-612화miR-551b균구유경배상적전체결구.반정량결과표명,저6개miRNAs균존재불동정도적성별차이표체.제4.5 d외,gga-miR-612화gga-miR-1456재기타검측시기적표체위자성고우웅성;재4.5~6.5 d계배성선중,gga-miR-551b재웅성중표체현저고우자성(P<0.05);gga-miR-126재3.5화6.5 d자성성선중적표체저우웅성,이4.5화5.5 d칙상반;gga-miR-1599재소검측시기중균위웅성중고표체차재4.5 d체겁현저수평(P<0.01),gga-miR-10b적표체여지상반.근거표체보결과추측gga-miR-551b이급gga-miR-1599가능섭급조기계배성선발육과정.