中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
5期
923-927
,共5页
娄远蕾%刘芬%高法梁%阮琼芳%崔苏萍%邓志锋%汪泱
婁遠蕾%劉芬%高法樑%阮瓊芳%崔囌萍%鄧誌鋒%汪泱
루원뢰%류분%고법량%원경방%최소평%산지봉%왕앙
miR-210%血管内皮细胞%血管内皮生长因子%Notch1
miR-210%血管內皮細胞%血管內皮生長因子%Notch1
miR-210%혈관내피세포%혈관내피생장인자%Notch1
目的:观察过表达miR-210对血管内皮细胞中血管内皮生长因子(VEGF)-Notch信号通路相关分子表达的影响,探讨miR-210调控血管新生的分子机制.方法:采用常规方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVE-12).通过转染LV- miR-210-GFP重组慢病毒载体上调内皮细胞miR-210表达,实验分为miR-210过表达组(LV- miR-210-GFP)和对照组(LV-GFP).采用real-time PCR检测miR-210的表达变化,流式细胞术检测ephrin-A3的表达,采用real-time PCR、Western blotting、免疫荧光细胞化学染色法分别检测VEGF-Notch信号通路相关分子VEGF、VEGF 2(VEGFR 2)、Notch1的mRNA和蛋白表达水平.结果:Real-time PCR结果显示,与对照组相比,miR-210过表达组miR-210表达水平上调了(32.10±1.26)倍;流式细胞术结果显示,miR-210过表达组阳性细胞率[(73.22±1.45)%] 较对照组[(12.52±0.67)%] 明显增加(P<0.05).Real-time PCR结果显示,miR-210过表达组 VEGF、VEGFR2、Notch1 mRNA分别较对照组上调了(7.40±0.67)、(2.50±0.10)、(9.70±0.72)倍,P<0.05;免疫荧光结果显示,miR-210过表达组VEGF和VEGFR2红色荧光信号均显著强于对照组(P<0.05).Western blotting 结果显示,miR-210过表达组血管内皮细胞中Notch1的蛋白表达量(4.22±0.60)较对照组明显升高(P<0.05).结论:miR-210过表达可显著上调VEGF-Notch信号通路分子的表达水平.
目的:觀察過錶達miR-210對血管內皮細胞中血管內皮生長因子(VEGF)-Notch信號通路相關分子錶達的影響,探討miR-210調控血管新生的分子機製.方法:採用常規方法培養人臍靜脈內皮細胞(HUVE-12).通過轉染LV- miR-210-GFP重組慢病毒載體上調內皮細胞miR-210錶達,實驗分為miR-210過錶達組(LV- miR-210-GFP)和對照組(LV-GFP).採用real-time PCR檢測miR-210的錶達變化,流式細胞術檢測ephrin-A3的錶達,採用real-time PCR、Western blotting、免疫熒光細胞化學染色法分彆檢測VEGF-Notch信號通路相關分子VEGF、VEGF 2(VEGFR 2)、Notch1的mRNA和蛋白錶達水平.結果:Real-time PCR結果顯示,與對照組相比,miR-210過錶達組miR-210錶達水平上調瞭(32.10±1.26)倍;流式細胞術結果顯示,miR-210過錶達組暘性細胞率[(73.22±1.45)%] 較對照組[(12.52±0.67)%] 明顯增加(P<0.05).Real-time PCR結果顯示,miR-210過錶達組 VEGF、VEGFR2、Notch1 mRNA分彆較對照組上調瞭(7.40±0.67)、(2.50±0.10)、(9.70±0.72)倍,P<0.05;免疫熒光結果顯示,miR-210過錶達組VEGF和VEGFR2紅色熒光信號均顯著彊于對照組(P<0.05).Western blotting 結果顯示,miR-210過錶達組血管內皮細胞中Notch1的蛋白錶達量(4.22±0.60)較對照組明顯升高(P<0.05).結論:miR-210過錶達可顯著上調VEGF-Notch信號通路分子的錶達水平.
목적:관찰과표체miR-210대혈관내피세포중혈관내피생장인자(VEGF)-Notch신호통로상관분자표체적영향,탐토miR-210조공혈관신생적분자궤제.방법:채용상규방법배양인제정맥내피세포(HUVE-12).통과전염LV- miR-210-GFP중조만병독재체상조내피세포miR-210표체,실험분위miR-210과표체조(LV- miR-210-GFP)화대조조(LV-GFP).채용real-time PCR검측miR-210적표체변화,류식세포술검측ephrin-A3적표체,채용real-time PCR、Western blotting、면역형광세포화학염색법분별검측VEGF-Notch신호통로상관분자VEGF、VEGF 2(VEGFR 2)、Notch1적mRNA화단백표체수평.결과:Real-time PCR결과현시,여대조조상비,miR-210과표체조miR-210표체수평상조료(32.10±1.26)배;류식세포술결과현시,miR-210과표체조양성세포솔[(73.22±1.45)%] 교대조조[(12.52±0.67)%] 명현증가(P<0.05).Real-time PCR결과현시,miR-210과표체조 VEGF、VEGFR2、Notch1 mRNA분별교대조조상조료(7.40±0.67)、(2.50±0.10)、(9.70±0.72)배,P<0.05;면역형광결과현시,miR-210과표체조VEGF화VEGFR2홍색형광신호균현저강우대조조(P<0.05).Western blotting 결과현시,miR-210과표체조혈관내피세포중Notch1적단백표체량(4.22±0.60)교대조조명현승고(P<0.05).결론:miR-210과표체가현저상조VEGF-Notch신호통로분자적표체수평.
