山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
31期
22-24
,共3页
戴海燕%王华%文少敏%解娜
戴海燕%王華%文少敏%解娜
대해연%왕화%문소민%해나
牙龈卟啉单胞菌%番茄果实特异启动子E8%菌毛蛋白%霍乱毒素B亚基
牙齦卟啉單胞菌%番茄果實特異啟動子E8%菌毛蛋白%霍亂毒素B亞基
아간계람단포균%번가과실특이계동자E8%균모단백%곽란독소B아기
目的 构建含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体,并提高抗原基因的表达量和免疫原性,为其在番茄果实内表达和研制有效的转基因植物牙周炎疫苗奠定基础.方法 通过PCR获得番茄果实特异表达启动子E8的核心序列片段(约1.11 kb),同时合成通过柔性接头连接的霍乱毒素B亚基(Cholera Toxin B Subunit,CTB)和牙龈卟啉单胞菌菌毛FimA(266-337)(约600 bp)序列的基因片段,利用重叠区扩增基因拼接法将两基因片段连接,得到重组片段E8-CTB-FimA (266-337),双酶切E8 -CTB-FimA( 266-337)片段和植物表达载体pBI121,酶切产物连接后,获得重组载体pBI E8-CTB-FimA (266-337),利用酶切方法和测序方法对pBIE8 -CTB-FimA(266-337)进行鉴定.结果 基因测序及酶切结果表明特异表达载体已成功构建.结论 本研究成功构建了含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体；该载体可用于转基因植物牙周炎疫苗的研制.
目的 構建含牙齦卟啉單胞菌菌毛融閤抗原基因的番茄果實特異錶達載體,併提高抗原基因的錶達量和免疫原性,為其在番茄果實內錶達和研製有效的轉基因植物牙週炎疫苗奠定基礎.方法 通過PCR穫得番茄果實特異錶達啟動子E8的覈心序列片段(約1.11 kb),同時閤成通過柔性接頭連接的霍亂毒素B亞基(Cholera Toxin B Subunit,CTB)和牙齦卟啉單胞菌菌毛FimA(266-337)(約600 bp)序列的基因片段,利用重疊區擴增基因拼接法將兩基因片段連接,得到重組片段E8-CTB-FimA (266-337),雙酶切E8 -CTB-FimA( 266-337)片段和植物錶達載體pBI121,酶切產物連接後,穫得重組載體pBI E8-CTB-FimA (266-337),利用酶切方法和測序方法對pBIE8 -CTB-FimA(266-337)進行鑒定.結果 基因測序及酶切結果錶明特異錶達載體已成功構建.結論 本研究成功構建瞭含牙齦卟啉單胞菌菌毛融閤抗原基因的番茄果實特異錶達載體；該載體可用于轉基因植物牙週炎疫苗的研製.
목적 구건함아간계람단포균균모융합항원기인적번가과실특이표체재체,병제고항원기인적표체량화면역원성,위기재번가과실내표체화연제유효적전기인식물아주염역묘전정기출.방법 통과PCR획득번가과실특이표체계동자E8적핵심서렬편단(약1.11 kb),동시합성통과유성접두련접적곽란독소B아기(Cholera Toxin B Subunit,CTB)화아간계람단포균균모FimA(266-337)(약600 bp)서렬적기인편단,이용중첩구확증기인병접법장량기인편단련접,득도중조편단E8-CTB-FimA (266-337),쌍매절E8 -CTB-FimA( 266-337)편단화식물표체재체pBI121,매절산물련접후,획득중조재체pBI E8-CTB-FimA (266-337),이용매절방법화측서방법대pBIE8 -CTB-FimA(266-337)진행감정.결과 기인측서급매절결과표명특이표체재체이성공구건.결론 본연구성공구건료함아간계람단포균균모융합항원기인적번가과실특이표체재체；해재체가용우전기인식물아주염역묘적연제.
