中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2007年
2期
213-215
,共3页
陈春美%杨卫忠%王春华%石松生%蓝佛琳%涂献坤
陳春美%楊衛忠%王春華%石鬆生%藍彿琳%塗獻坤
진춘미%양위충%왕춘화%석송생%람불림%도헌곤
缺氧%脱噬作用%p38MAPK%Caspase-3
缺氧%脫噬作用%p38MAPK%Caspase-3
결양%탈서작용%p38MAPK%Caspase-3
目的 探讨缺氧引起PC12细胞凋亡和NOS、p38MAPK和Caspase-3在缺氧后神经细胞凋亡中的共同作用机制.方法 应用噻唑蓝(MTT)法测定缺氧对PC12细胞的生长抑制率,荧光显微镜观察缺氧对PC12细胞损伤,比色法测定PC12细胞在缺氧环境下乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术(FCM)检测缺氧PC12细胞NT阳性细胞百分比,以及细胞周期改变和细胞凋亡率,RT-PCR半定量分析nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的表达.结果 MTT法测定缺氧抑制PC12细胞生长趋势;AO荧光染色缺氧24 h时PC12细胞可见凋亡小体;缺氧时间延长,LDH渗出量增多,NT阳性细胞百分比增大,S期细胞增多,细胞凋亡率升高,缺氧24 h调亡率达到45.67%;PCR结果分析显示nNOS mRNA在缺氧早期表达,iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA主要在缺氧晚期表达.结论 缺氧能够引起PC12细胞凋亡现象,nNOS、iNOS分别在缺氧早期和晚期发挥神经毒性作用,NOS,p38MAPK和Caspase-3三种基因共同介导缺氧后PC12细胞凋亡.
目的 探討缺氧引起PC12細胞凋亡和NOS、p38MAPK和Caspase-3在缺氧後神經細胞凋亡中的共同作用機製.方法 應用噻唑藍(MTT)法測定缺氧對PC12細胞的生長抑製率,熒光顯微鏡觀察缺氧對PC12細胞損傷,比色法測定PC12細胞在缺氧環境下乳痠脫氫酶(LDH)活性,流式細胞術(FCM)檢測缺氧PC12細胞NT暘性細胞百分比,以及細胞週期改變和細胞凋亡率,RT-PCR半定量分析nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的錶達.結果 MTT法測定缺氧抑製PC12細胞生長趨勢;AO熒光染色缺氧24 h時PC12細胞可見凋亡小體;缺氧時間延長,LDH滲齣量增多,NT暘性細胞百分比增大,S期細胞增多,細胞凋亡率升高,缺氧24 h調亡率達到45.67%;PCR結果分析顯示nNOS mRNA在缺氧早期錶達,iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA主要在缺氧晚期錶達.結論 缺氧能夠引起PC12細胞凋亡現象,nNOS、iNOS分彆在缺氧早期和晚期髮揮神經毒性作用,NOS,p38MAPK和Caspase-3三種基因共同介導缺氧後PC12細胞凋亡.
목적 탐토결양인기PC12세포조망화NOS、p38MAPK화Caspase-3재결양후신경세포조망중적공동작용궤제.방법 응용새서람(MTT)법측정결양대PC12세포적생장억제솔,형광현미경관찰결양대PC12세포손상,비색법측정PC12세포재결양배경하유산탈경매(LDH)활성,류식세포술(FCM)검측결양PC12세포NT양성세포백분비,이급세포주기개변화세포조망솔,RT-PCR반정량분석nNOS、iNOS、p38MAPK화Caspase-3 mRNA적표체.결과 MTT법측정결양억제PC12세포생장추세;AO형광염색결양24 h시PC12세포가견조망소체;결양시간연장,LDH삼출량증다,NT양성세포백분비증대,S기세포증다,세포조망솔승고,결양24 h조망솔체도45.67%;PCR결과분석현시nNOS mRNA재결양조기표체,iNOS、p38MAPK화Caspase-3 mRNA주요재결양만기표체.결론 결양능구인기PC12세포조망현상,nNOS、iNOS분별재결양조기화만기발휘신경독성작용,NOS,p38MAPK화Caspase-3삼충기인공동개도결양후PC12세포조망.
