中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2004年
1期
43-48
,共6页
乔红%姚伦广%德格晶%齐义鹏%周文科%王志民
喬紅%姚倫廣%德格晶%齊義鵬%週文科%王誌民
교홍%요륜엄%덕격정%제의붕%주문과%왕지민
重组杆状病毒%苏云金芽胞杆菌%cryIAc10 基因%Bac-to-Bac系统%基因表达
重組桿狀病毒%囌雲金芽胞桿菌%cryIAc10 基因%Bac-to-Bac繫統%基因錶達
중조간상병독%소운금아포간균%cryIAc10 기인%Bac-to-Bac계통%기인표체
用Bac-to-Bac系统,构建了包含极晚期基因ph启动子驱动的带有全长苏云金芽胞杆菌cryIAc10基因和完整多角体基因的重组质粒pFCP, 用该重组质粒感染昆虫Sf9细胞,得到了带有多角体和能够表达cry1Ac10基因的重组杆状病毒vFcph,并在昆虫细胞中表达了Cry1Ac10蛋白.同时构建了含cry1Ac10的穿梭载体pHTC,并分别转化大肠杆菌、枯草杆菌和苏云金杆菌晶体缺陷型菌株,结果表明此三种工程菌均表达了分子量为133.3kDa的原毒素蛋白,其中在苏云金芽胞杆菌中的表达量最高.生物测定表明重组杆状病毒vFcph的表达产物具有杀虫活性,能增加杆状病毒力,加快杆状病毒杀虫速度,说明利用杆状病毒极晚期基因启动子驱动苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白表达,从而改善杆状病毒的杀虫特性是可行的.
用Bac-to-Bac繫統,構建瞭包含極晚期基因ph啟動子驅動的帶有全長囌雲金芽胞桿菌cryIAc10基因和完整多角體基因的重組質粒pFCP, 用該重組質粒感染昆蟲Sf9細胞,得到瞭帶有多角體和能夠錶達cry1Ac10基因的重組桿狀病毒vFcph,併在昆蟲細胞中錶達瞭Cry1Ac10蛋白.同時構建瞭含cry1Ac10的穿梭載體pHTC,併分彆轉化大腸桿菌、枯草桿菌和囌雲金桿菌晶體缺陷型菌株,結果錶明此三種工程菌均錶達瞭分子量為133.3kDa的原毒素蛋白,其中在囌雲金芽胞桿菌中的錶達量最高.生物測定錶明重組桿狀病毒vFcph的錶達產物具有殺蟲活性,能增加桿狀病毒力,加快桿狀病毒殺蟲速度,說明利用桿狀病毒極晚期基因啟動子驅動囌雲金芽胞桿菌殺蟲晶體蛋白錶達,從而改善桿狀病毒的殺蟲特性是可行的.
용Bac-to-Bac계통,구건료포함겁만기기인ph계동자구동적대유전장소운금아포간균cryIAc10기인화완정다각체기인적중조질립pFCP, 용해중조질립감염곤충Sf9세포,득도료대유다각체화능구표체cry1Ac10기인적중조간상병독vFcph,병재곤충세포중표체료Cry1Ac10단백.동시구건료함cry1Ac10적천사재체pHTC,병분별전화대장간균、고초간균화소운금간균정체결함형균주,결과표명차삼충공정균균표체료분자량위133.3kDa적원독소단백,기중재소운금아포간균중적표체량최고.생물측정표명중조간상병독vFcph적표체산물구유살충활성,능증가간상병독력,가쾌간상병독살충속도,설명이용간상병독겁만기기인계동자구동소운금아포간균살충정체단백표체,종이개선간상병독적살충특성시가행적.
