中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2005年
7期
535-539
,共5页
李光源%贺冰%冯非%孟祥俊%宋忆淑%王晓祺
李光源%賀冰%馮非%孟祥俊%宋憶淑%王曉祺
리광원%하빙%풍비%맹상준%송억숙%왕효기
单纯疱疹病毒%DNA疫苗%糖蛋白B%流式细胞术%CFSE
單純皰疹病毒%DNA疫苗%糖蛋白B%流式細胞術%CFSE
단순포진병독%DNA역묘%당단백B%류식세포술%CFSE
目的:构建、制备单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)糖蛋白B DNA疫苗,检测其诱导机体产生的细胞免疫应答.方法:PCR扩增编码HSV-Ⅰ gB去除N端部分信号肽序列(39 bp)的基因片段(2 673 bp),定向插入pcDNA3载体中,构建pcDNA3-gB基因疫苗并对其进行PCR、酶切及测序鉴定.于BALB/c小鼠注射免疫3次,观察小鼠CD4+、CD8+T细胞亚群的变化,CFSE/PI双标记的流式细胞计数法检测CTL活性.结果:双酶切分析结果为目的基因(2.7 kb)和线性质粒pcDNA3(5.4 kb);PCR扩增结果为特异产物(2.7 kb);测序结果与GenBank gB基因序列同源性达99.5%;CTL活性增强;BALB/c小鼠脾CD4+T细胞增加.结论:经鉴定证实了HSV-Ⅰ gB基因疫苗的构建;HSV-Ⅰ gB基因疫苗可以诱导较强的细胞免疫应答,应用于预防HSV-Ⅰ的感染具有良好的前景.
目的:構建、製備單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)糖蛋白B DNA疫苗,檢測其誘導機體產生的細胞免疫應答.方法:PCR擴增編碼HSV-Ⅰ gB去除N耑部分信號肽序列(39 bp)的基因片段(2 673 bp),定嚮插入pcDNA3載體中,構建pcDNA3-gB基因疫苗併對其進行PCR、酶切及測序鑒定.于BALB/c小鼠註射免疫3次,觀察小鼠CD4+、CD8+T細胞亞群的變化,CFSE/PI雙標記的流式細胞計數法檢測CTL活性.結果:雙酶切分析結果為目的基因(2.7 kb)和線性質粒pcDNA3(5.4 kb);PCR擴增結果為特異產物(2.7 kb);測序結果與GenBank gB基因序列同源性達99.5%;CTL活性增彊;BALB/c小鼠脾CD4+T細胞增加.結論:經鑒定證實瞭HSV-Ⅰ gB基因疫苗的構建;HSV-Ⅰ gB基因疫苗可以誘導較彊的細胞免疫應答,應用于預防HSV-Ⅰ的感染具有良好的前景.
목적:구건、제비단순포진병독Ⅰ형(HSV-Ⅰ)당단백B DNA역묘,검측기유도궤체산생적세포면역응답.방법:PCR확증편마HSV-Ⅰ gB거제N단부분신호태서렬(39 bp)적기인편단(2 673 bp),정향삽입pcDNA3재체중,구건pcDNA3-gB기인역묘병대기진행PCR、매절급측서감정.우BALB/c소서주사면역3차,관찰소서CD4+、CD8+T세포아군적변화,CFSE/PI쌍표기적류식세포계수법검측CTL활성.결과:쌍매절분석결과위목적기인(2.7 kb)화선성질립pcDNA3(5.4 kb);PCR확증결과위특이산물(2.7 kb);측서결과여GenBank gB기인서렬동원성체99.5%;CTL활성증강;BALB/c소서비CD4+T세포증가.결론:경감정증실료HSV-Ⅰ gB기인역묘적구건;HSV-Ⅰ gB기인역묘가이유도교강적세포면역응답,응용우예방HSV-Ⅰ적감염구유량호적전경.
