中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2007年
3期
241-243
,共3页
骨形态发生蛋白7%心肌细胞%基因表达%转染
骨形態髮生蛋白7%心肌細胞%基因錶達%轉染
골형태발생단백7%심기세포%기인표체%전염
目的:构建重组鼠骨形态发生蛋白7(BMP-7)的真核表达载体,并观察其在原代培养乳鼠心肌细胞中的表达情况.方法:将RT-PCR法获得的重组鼠BMP-7 cDNA克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,在FuGENE 6.0介导下转染差速贴壁法体外培养的乳鼠心肌细胞,72 h后分别应用RT-PCR、免疫细胞化学法和Western blotting检测mRNA和蛋白水平的表达情况.结果:经过PCR及酶切鉴定证明获得了真核表达质粒pcDNA3.1-BMP-7;通过RT-PCR、免疫细胞化学法和Western blotting证明pcDNA3.1-BMP-7能有效转染心肌细胞并表达BMP-7蛋白.结论:应用pcDNA3.1载体系统可有效转染重组鼠BMP-7,为应用于抗缺血再灌注损伤的研究创造了条件.
目的:構建重組鼠骨形態髮生蛋白7(BMP-7)的真覈錶達載體,併觀察其在原代培養乳鼠心肌細胞中的錶達情況.方法:將RT-PCR法穫得的重組鼠BMP-7 cDNA剋隆入真覈錶達載體pcDNA3.1中,在FuGENE 6.0介導下轉染差速貼壁法體外培養的乳鼠心肌細胞,72 h後分彆應用RT-PCR、免疫細胞化學法和Western blotting檢測mRNA和蛋白水平的錶達情況.結果:經過PCR及酶切鑒定證明穫得瞭真覈錶達質粒pcDNA3.1-BMP-7;通過RT-PCR、免疫細胞化學法和Western blotting證明pcDNA3.1-BMP-7能有效轉染心肌細胞併錶達BMP-7蛋白.結論:應用pcDNA3.1載體繫統可有效轉染重組鼠BMP-7,為應用于抗缺血再灌註損傷的研究創造瞭條件.
목적:구건중조서골형태발생단백7(BMP-7)적진핵표체재체,병관찰기재원대배양유서심기세포중적표체정황.방법:장RT-PCR법획득적중조서BMP-7 cDNA극륭입진핵표체재체pcDNA3.1중,재FuGENE 6.0개도하전염차속첩벽법체외배양적유서심기세포,72 h후분별응용RT-PCR、면역세포화학법화Western blotting검측mRNA화단백수평적표체정황.결과:경과PCR급매절감정증명획득료진핵표체질립pcDNA3.1-BMP-7;통과RT-PCR、면역세포화학법화Western blotting증명pcDNA3.1-BMP-7능유효전염심기세포병표체BMP-7단백.결론:응용pcDNA3.1재체계통가유효전염중조서BMP-7,위응용우항결혈재관주손상적연구창조료조건.
