CAJ | 학술논문

伪狂犬病是世界范围内严重影响养猪业发展的重要动物疫病,快速检测是有效防控该病的重要措施之一.为了建立该病的快速分子生物学检测方法,根据GenBank中登录的伪狂犬病病毒gD基因序列,选择高度保守区域设计引物和TaqMan 荧光探针,通过对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立了用于检测伪狂犬病病毒的实时荧光PCR方法.特异性试验结果表明,该检测方法只能检测到目的病毒,表明其具有良好的特异性.灵敏性试验发现,其最低检测限可达1.42 pg/μL的总DNA,与PCR方法的灵敏度对比试验表明,其敏感度比PCR至少高10倍.对同一样品进行重复性检测,在组内及组间检测的荧光扩增曲线基本重叠,证实其重复性好.对180份临床样品进行伪狂犬病病毒核酸检测,结果发现有52份阳性样品.结果表明,所建立的实时荧光PCR方法可对伪狂犬病病毒进行准确、快速的检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性好的优点,是开展伪狂犬病的临床检测和疫情监测工作的有力工具.
위광견병시세계범위내엄중영향양저업발전적중요동물역병,쾌속검측시유효방공해병적중요조시지일.위료건립해병적쾌속분자생물학검측방법,근거GenBank중등록적위광견병병독gD기인서렬,선택고도보수구역설계인물화TaqMan 형광탐침,통과대실시형광PCR반응조건진행우화,건립료용우검측위광견병병독적실시형광PCR방법.특이성시험결과표명,해검측방법지능검측도목적병독,표명기구유량호적특이성.령민성시험발현,기최저검측한가체1.42 pg/μL적총DNA,여PCR방법적령민도대비시험표명,기민감도비PCR지소고10배.대동일양품진행중복성검측,재조내급조간검측적형광확증곡선기본중첩,증실기중복성호.대180빈림상양품진행위광견병병독핵산검측,결과발현유52빈양성양품.결과표명,소건립적실시형광PCR방법가대위광견병병독진행준학、쾌속적검측,구유특이성호、령민도고、중복성호적우점,시개전위광견병적림상검측화역정감측공작적유력공구.