中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2010年
11期
968-972
,共5页
王健%胡四海%戴志兵%胡耀华%张愉快%余敏君
王健%鬍四海%戴誌兵%鬍耀華%張愉快%餘敏君
왕건%호사해%대지병%호요화%장유쾌%여민군
淋球菌%奈瑟菌表面蛋白A%LTB%融合基因疫苗%免疫效果
淋毬菌%奈瑟菌錶麵蛋白A%LTB%融閤基因疫苗%免疫效果
림구균%내슬균표면단백A%LTB%융합기인역묘%면역효과
目的:用真核重组质粒pcDNA3.1(-)/ltB-nspA鼻饲免疫小鼠,探索粘膜佐剂LTB辅佐NspA所诱发的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答水平.方法:对真核重组质粒行PCR及双酶切鉴定后大量制备,经鼻饲途径免疫雌性BALB/c小鼠,间接ELISA法检测血清中NspA特异性IgG抗体水平及小鼠生殖道灌洗液中NspA特异性sIgA抗体水平;MTT法检测脾淋巴细胞增殖水平,ELISA双抗体夹心法检测脾淋巴细胞培养上清IFN-γ含量.结果:融合基因pcDNA3.1(-)/ltB-nspA组小鼠生殖道灌洗液中sIgA(A450:0.316±0.045)明显高于pcDNA3.1(-)/nspA单基因组(P<0.05)和其它对照组(P<0.01);小鼠血清中IgG(A450:0.643±0.156)水平、脾淋巴细胞刺激指数(SI:1.65±0.32)和脾淋巴细胞诱生的IFN-γ(160.56±25.67 pg/ml)水平均明显高于pcDNA3.1(-)/ltB、空质粒pcDNA3.1(-)和PBS对照组(P<0.01).结论:pcDNA3.1(-)/ltB-nspA融合基因疫苗经鼻饲免疫,能够诱导小鼠产生较强的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答;粘膜佐剂LTB可辅佐NspA诱导小鼠产生更高水平的生殖道粘膜免疫.
目的:用真覈重組質粒pcDNA3.1(-)/ltB-nspA鼻飼免疫小鼠,探索粘膜佐劑LTB輔佐NspA所誘髮的特異性體液免疫應答和細胞免疫應答水平.方法:對真覈重組質粒行PCR及雙酶切鑒定後大量製備,經鼻飼途徑免疫雌性BALB/c小鼠,間接ELISA法檢測血清中NspA特異性IgG抗體水平及小鼠生殖道灌洗液中NspA特異性sIgA抗體水平;MTT法檢測脾淋巴細胞增殖水平,ELISA雙抗體夾心法檢測脾淋巴細胞培養上清IFN-γ含量.結果:融閤基因pcDNA3.1(-)/ltB-nspA組小鼠生殖道灌洗液中sIgA(A450:0.316±0.045)明顯高于pcDNA3.1(-)/nspA單基因組(P<0.05)和其它對照組(P<0.01);小鼠血清中IgG(A450:0.643±0.156)水平、脾淋巴細胞刺激指數(SI:1.65±0.32)和脾淋巴細胞誘生的IFN-γ(160.56±25.67 pg/ml)水平均明顯高于pcDNA3.1(-)/ltB、空質粒pcDNA3.1(-)和PBS對照組(P<0.01).結論:pcDNA3.1(-)/ltB-nspA融閤基因疫苗經鼻飼免疫,能夠誘導小鼠產生較彊的特異性體液免疫應答和細胞免疫應答;粘膜佐劑LTB可輔佐NspA誘導小鼠產生更高水平的生殖道粘膜免疫.
목적:용진핵중조질립pcDNA3.1(-)/ltB-nspA비사면역소서,탐색점막좌제LTB보좌NspA소유발적특이성체액면역응답화세포면역응답수평.방법:대진핵중조질립행PCR급쌍매절감정후대량제비,경비사도경면역자성BALB/c소서,간접ELISA법검측혈청중NspA특이성IgG항체수평급소서생식도관세액중NspA특이성sIgA항체수평;MTT법검측비림파세포증식수평,ELISA쌍항체협심법검측비림파세포배양상청IFN-γ함량.결과:융합기인pcDNA3.1(-)/ltB-nspA조소서생식도관세액중sIgA(A450:0.316±0.045)명현고우pcDNA3.1(-)/nspA단기인조(P<0.05)화기타대조조(P<0.01);소서혈청중IgG(A450:0.643±0.156)수평、비림파세포자격지수(SI:1.65±0.32)화비림파세포유생적IFN-γ(160.56±25.67 pg/ml)수평균명현고우pcDNA3.1(-)/ltB、공질립pcDNA3.1(-)화PBS대조조(P<0.01).결론:pcDNA3.1(-)/ltB-nspA융합기인역묘경비사면역,능구유도소서산생교강적특이성체액면역응답화세포면역응답;점막좌제LTB가보좌NspA유도소서산생경고수평적생식도점막면역.