Myostatin基因沉默绵羊成纤维细胞系的建立
Myostatin기인침묵면양성섬유세포계적건립
Establishment of Sheep Fibroblast Cell Line with Myostatin Gene Silencing
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2011年 10期 1368-1373 ,共6页

    唐大运%朱化彬%吴健敏%杜卫华%王栋%赵学明%陈汉忠%林秀坤

    당대운%주화빈%오건민%두위화%왕동%조학명%진한충%림수곤

    肌肉生长抑制素%RNA干扰%慢病毒%绵羊成纤维细胞 肌肉生長抑製素%RNA榦擾%慢病毒%綿羊成纖維細胞
    기육생장억제소%RNA간우%만병독%면양성섬유세포
    旨在获得肌肉生长抑制素( Myostatin,MSTN)基因沉默的成纤维细胞系,为进一步探索Myostatin的调控机理,获得Myostatin的基因沉默的转基因羊奠定基础.针对小尾寒羊Myostatin的基因序列,设计4条siRNA干扰序列,构建pSilencer干扰载体,转染成纤维细胞,采用RT-PCR进行筛选；构建慢病毒干扰载体,包装病毒,感染成纤维细胞,采用流式细胞技术分选阳性细胞,阳性细胞予以测序鉴定并检测沉默效果.结果,获得Myostatin基因沉默效率约90％的RNA干扰片段PSL1,包装病毒获得滴度为1×108的病毒颗粒,流式细胞技术分选得到纯度达99％的Myostatin基因沉默成纤维细胞系.采用慢病毒感染接合流式细胞术分选,能较快获得无抗性标记的转基因阳性细胞系,为培育Myostatin基因沉默的转基因羊及探索Myostatin的调控机理奠定基础.
    지재획득기육생장억제소( Myostatin,MSTN)기인침묵적성섬유세포계,위진일보탐색Myostatin적조공궤리,획득Myostatin적기인침묵적전기인양전정기출.침대소미한양Myostatin적기인서렬,설계4조siRNA간우서렬,구건pSilencer간우재체,전염성섬유세포,채용RT-PCR진행사선；구건만병독간우재체,포장병독,감염성섬유세포,채용류식세포기술분선양성세포,양성세포여이측서감정병검측침묵효과.결과,획득Myostatin기인침묵효솔약90％적RNA간우편단PSL1,포장병독획득적도위1×108적병독과립,류식세포기술분선득도순도체99％적Myostatin기인침묵성섬유세포계.채용만병독감염접합류식세포술분선,능교쾌획득무항성표기적전기인양성세포계,위배육Myostatin기인침묵적전기인양급탐색Myostatin적조공궤리전정기출.
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