现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2012年
5期
95-96,99
,共3页
康毓芝%王永兴%杨宝珍%韩恩善
康毓芝%王永興%楊寶珍%韓恩善
강육지%왕영흥%양보진%한은선
DNA提取%石蜡包埋组织%聚合酶链反应
DNA提取%石蠟包埋組織%聚閤酶鏈反應
DNA제취%석사포매조직%취합매련반응
目的 探讨一种乳腺癌患者石蜡包埋组织乳腺癌组织DNA提取方法并进行验证.方法 选择无自溶、退变或组织结构不清、大片出血的70例10 ml/dl甲醛固定石蜡包埋乳腺癌组织,在避免交叉污染的情况下,经过TES溶液水浴脱蜡后,先后用PBS缓冲液(pH7.2)及无水、95 ml/dl,75 ml/dl浓度梯度的乙醇60℃温浴4 h;加入含蛋白酶K的裂解液56℃消化72 h后,酚氯仿法抽提DNA.通过聚合酶链反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度仪测定A260nm/A280nm值,分析所提取DNA的质量.结果 62例(88.57%)石蜡组织标本DNA获得成功提取,所得DNA样本A260nm/A280nm比值为1.78±0.16,采用此条件处理的样本可获得足够数量的完整DNA,抽提率高,可满足后续临床研究需要.结论 改进的石蜡包埋组织提取DNA方法简单、经济,是较理想的非试剂盒法石蜡包埋组织DNA提取方法.
目的 探討一種乳腺癌患者石蠟包埋組織乳腺癌組織DNA提取方法併進行驗證.方法 選擇無自溶、退變或組織結構不清、大片齣血的70例10 ml/dl甲醛固定石蠟包埋乳腺癌組織,在避免交扠汙染的情況下,經過TES溶液水浴脫蠟後,先後用PBS緩遲液(pH7.2)及無水、95 ml/dl,75 ml/dl濃度梯度的乙醇60℃溫浴4 h;加入含蛋白酶K的裂解液56℃消化72 h後,酚氯倣法抽提DNA.通過聚閤酶鏈反應(PCR)、瓊脂糖凝膠電泳及紫外分光光度儀測定A260nm/A280nm值,分析所提取DNA的質量.結果 62例(88.57%)石蠟組織標本DNA穫得成功提取,所得DNA樣本A260nm/A280nm比值為1.78±0.16,採用此條件處理的樣本可穫得足夠數量的完整DNA,抽提率高,可滿足後續臨床研究需要.結論 改進的石蠟包埋組織提取DNA方法簡單、經濟,是較理想的非試劑盒法石蠟包埋組織DNA提取方法.
목적 탐토일충유선암환자석사포매조직유선암조직DNA제취방법병진행험증.방법 선택무자용、퇴변혹조직결구불청、대편출혈적70례10 ml/dl갑철고정석사포매유선암조직,재피면교차오염적정황하,경과TES용액수욕탈사후,선후용PBS완충액(pH7.2)급무수、95 ml/dl,75 ml/dl농도제도적을순60℃온욕4 h;가입함단백매K적렬해액56℃소화72 h후,분록방법추제DNA.통과취합매련반응(PCR)、경지당응효전영급자외분광광도의측정A260nm/A280nm치,분석소제취DNA적질량.결과 62례(88.57%)석사조직표본DNA획득성공제취,소득DNA양본A260nm/A280nm비치위1.78±0.16,채용차조건처리적양본가획득족구수량적완정DNA,추제솔고,가만족후속림상연구수요.결론 개진적석사포매조직제취DNA방법간단、경제,시교이상적비시제합법석사포매조직DNA제취방법.