CAJ | 학술논문

目的在大肠埃希菌中高效表达重组人干扰素-λ2(rhIFN-λ2),并对其抗病毒活性进行初步研究.方法根据大肠埃希菌的偏爱密码子人工设计合成人干扰素-λ2(hIFN-λ2)的高表达基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,在大肠埃希菌中进行表达,表达产物经变性、复性、阳离子交换层析及分子筛层析纯化,测定其抗病毒活性、种属特异性及抗HBV活性.结果在大肠埃希菌表达的目的蛋白占细胞总蛋白量的15%左右,纯化后的纯度达到90%以上,在WISH细胞上抗VSV活性约为1.5×106 IU/mg.与rhIFN-α2b比较,表达产物在非灵长类细胞上的抗病毒活性较在灵长类细胞上弱,目的蛋白在HepG2.2.15细胞上表现有与rhIFN-α2b相似的抗HBV活性.结论hIFN-λ2可以在大肠埃希菌内实现高效表达,表达产物具有抗病毒活性,有与rhIFN-α2b相似的抗HBV活性,本型IFN有较严格的种属特异性.
목적재대장애희균중고효표체중조인간우소-λ2(rhIFN-λ2),병대기항병독활성진행초보연구.방법근거대장애희균적편애밀마자인공설계합성인간우소-λ2(hIFN-λ2)적고표체기인,장기극륭도원핵표체재체pBV220,재대장애희균중진행표체,표체산물경변성、복성、양리자교환층석급분자사층석순화,측정기항병독활성、충속특이성급항HBV활성.결과재대장애희균표체적목적단백점세포총단백량적15%좌우,순화후적순도체도90%이상,재WISH세포상항VSV활성약위1.5×106 IU/mg.여rhIFN-α2b비교,표체산물재비령장류세포상적항병독활성교재령장류세포상약,목적단백재HepG2.2.15세포상표현유여rhIFN-α2b상사적항HBV활성.결론hIFN-λ2가이재대장애희균내실현고효표체,표체산물구유항병독활성,유여rhIFN-α2b상사적항HBV활성,본형IFN유교엄격적충속특이성.