中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2012年
6期
490-493
,共4页
勾文峰%杨雪%徐小燕%王建平%郑华川
勾文峰%楊雪%徐小燕%王建平%鄭華川
구문봉%양설%서소연%왕건평%정화천
选择性剪接%RT-PCR
選擇性剪接%RT-PCR
선택성전접%RT-PCR
目的 利用RT-PCR方法检测并分析mRNA选择性剪接变异体.方法 针对糖原合成酶激酶(GSK)3β和B细胞转位基因( BTG)3基因变异体差别设计引物,利用RT-PCR扩增后进行电泳和克隆DNA测序.结果 GSK3β和BTG3的RT-PCR产物电泳均出现3条带,经过电泳和克隆DNA测序发现GSK-3β中上面2条带为同一产物.对BTG3上(位于319 bp)、下(位于70 bp)2条带进一步PCR扩增后测序,结果发现3个条带均为同一产物.结论 RT-PCR法检测选择性剪接产物操作方便,对Western蛋白印迹结果评价具有指导意义,但是产生的非特异条带可能是由于某种特殊原因造成,如选择性剪接部位的特异核酸序列,需DNA测序做进一步确定.
目的 利用RT-PCR方法檢測併分析mRNA選擇性剪接變異體.方法 針對糖原閤成酶激酶(GSK)3β和B細胞轉位基因( BTG)3基因變異體差彆設計引物,利用RT-PCR擴增後進行電泳和剋隆DNA測序.結果 GSK3β和BTG3的RT-PCR產物電泳均齣現3條帶,經過電泳和剋隆DNA測序髮現GSK-3β中上麵2條帶為同一產物.對BTG3上(位于319 bp)、下(位于70 bp)2條帶進一步PCR擴增後測序,結果髮現3箇條帶均為同一產物.結論 RT-PCR法檢測選擇性剪接產物操作方便,對Western蛋白印跡結果評價具有指導意義,但是產生的非特異條帶可能是由于某種特殊原因造成,如選擇性剪接部位的特異覈痠序列,需DNA測序做進一步確定.
목적 이용RT-PCR방법검측병분석mRNA선택성전접변이체.방법 침대당원합성매격매(GSK)3β화B세포전위기인( BTG)3기인변이체차별설계인물,이용RT-PCR확증후진행전영화극륭DNA측서.결과 GSK3β화BTG3적RT-PCR산물전영균출현3조대,경과전영화극륭DNA측서발현GSK-3β중상면2조대위동일산물.대BTG3상(위우319 bp)、하(위우70 bp)2조대진일보PCR확증후측서,결과발현3개조대균위동일산물.결론 RT-PCR법검측선택성전접산물조작방편,대Western단백인적결과평개구유지도의의,단시산생적비특이조대가능시유우모충특수원인조성,여선택성전접부위적특이핵산서렬,수DNA측서주진일보학정.