中国医药指南
中國醫藥指南
중국의약지남
CHINA MEDICINE GUIDE
2012年
19期
22-24
,共3页
噬菌体展示%肺癌%抗体
噬菌體展示%肺癌%抗體
서균체전시%폐암%항체
目的 应用噬菌体展示技术,构建天然人源抗肺癌噬菌体抗体组合文库,筛选能与肺癌细胞特异结合的抗体.方法 用RNA 提取试剂盒提取淋巴细胞RNA,以Oligo DT 为引物反转录合成cDNA,以半套式PCR 扩增轻链和重链可变区抗体基因并重组到原核表达载体中,通过噬菌体外壳蛋白形成融合蛋白,形成噬菌体抗体组合文库.结果 电泳显示扩增的mRNA 有清晰的28s、18s 和5.8s 的条带,600～700bp 片段者为重组克隆;噬菌体展示抗体库大小在108～107 之间;优化电转化条件,最终得到库容为1.2×108cfu,双链重组率为41% 的抗体库.结论 成功构建人源抗肺癌噬菌体展示文库,为下一步筛选具有肺癌细胞特异亲和力的人源性单克隆抗体奠定了基础.
目的 應用噬菌體展示技術,構建天然人源抗肺癌噬菌體抗體組閤文庫,篩選能與肺癌細胞特異結閤的抗體.方法 用RNA 提取試劑盒提取淋巴細胞RNA,以Oligo DT 為引物反轉錄閤成cDNA,以半套式PCR 擴增輕鏈和重鏈可變區抗體基因併重組到原覈錶達載體中,通過噬菌體外殼蛋白形成融閤蛋白,形成噬菌體抗體組閤文庫.結果 電泳顯示擴增的mRNA 有清晰的28s、18s 和5.8s 的條帶,600～700bp 片段者為重組剋隆;噬菌體展示抗體庫大小在108～107 之間;優化電轉化條件,最終得到庫容為1.2×108cfu,雙鏈重組率為41% 的抗體庫.結論 成功構建人源抗肺癌噬菌體展示文庫,為下一步篩選具有肺癌細胞特異親和力的人源性單剋隆抗體奠定瞭基礎.
목적 응용서균체전시기술,구건천연인원항폐암서균체항체조합문고,사선능여폐암세포특이결합적항체.방법 용RNA 제취시제합제취림파세포RNA,이Oligo DT 위인물반전록합성cDNA,이반투식PCR 확증경련화중련가변구항체기인병중조도원핵표체재체중,통과서균체외각단백형성융합단백,형성서균체항체조합문고.결과 전영현시확증적mRNA 유청석적28s、18s 화5.8s 적조대,600～700bp 편단자위중조극륭;서균체전시항체고대소재108～107 지간;우화전전화조건,최종득도고용위1.2×108cfu,쌍련중조솔위41% 적항체고.결론 성공구건인원항폐암서균체전시문고,위하일보사선구유폐암세포특이친화력적인원성단극륭항체전정료기출.
