湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2012年
5期
1002-1005
,共4页
潘熙萍%楼佳俊%张高精%张丽莎%施曼玲
潘熙萍%樓佳俊%張高精%張麗莎%施曼玲
반희평%루가준%장고정%장려사%시만령
草甘膦(Glyphosate,GLY)%多克隆抗体%间接竞争酶联免疫吸附法
草甘膦(Glyphosate,GLY)%多剋隆抗體%間接競爭酶聯免疫吸附法
초감련(Glyphosate,GLY)%다극륭항체%간접경쟁매련면역흡부법
通过碳化二亚胺法将草甘膦(Glyphosate,GLY)分别与卵清蛋白(OVA)和牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原和包被原.基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测表明,草甘膦与牛血清白蛋白和卵清蛋白的偶联比分别为11∶1和9∶1.合成的免疫原作用新西兰大白兔制备出草甘膦多克隆抗体,ELISA检测抗体溶液效价为1∶1×107,该抗体不与草甘膦的结构类似物增甘膦和双甘膦起交叉反应.以此抗体建立了草甘膦间接竞争ELISA检测方法(ciELISA),其线性范围为0.78～100 μg/mL,线性回归方程为y=15.851 0 lnx+7.780 5,R2=0.993 8.草甘膦的检测限为IC10=1.15μg/mL,IC50=14.35 μg/mL.在添加回收试验中,草甘膦添加值5和10 μg/g时,玉米粉中的草甘膦回收率为104.12％和81.37％,小麦粉中的回收率则分别为118.94％和为109.39％.结果表明,采用所制备的多克隆抗体而建立的草甘膦ciELISA方法可有效地应用于玉米粉和小麦粉中草甘膦的残留检测.
通過碳化二亞胺法將草甘膦(Glyphosate,GLY)分彆與卵清蛋白(OVA)和牛血清白蛋白(BSA)偶聯製備免疫原和包被原.基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)檢測錶明,草甘膦與牛血清白蛋白和卵清蛋白的偶聯比分彆為11∶1和9∶1.閤成的免疫原作用新西蘭大白兔製備齣草甘膦多剋隆抗體,ELISA檢測抗體溶液效價為1∶1×107,該抗體不與草甘膦的結構類似物增甘膦和雙甘膦起交扠反應.以此抗體建立瞭草甘膦間接競爭ELISA檢測方法(ciELISA),其線性範圍為0.78～100 μg/mL,線性迴歸方程為y=15.851 0 lnx+7.780 5,R2=0.993 8.草甘膦的檢測限為IC10=1.15μg/mL,IC50=14.35 μg/mL.在添加迴收試驗中,草甘膦添加值5和10 μg/g時,玉米粉中的草甘膦迴收率為104.12％和81.37％,小麥粉中的迴收率則分彆為118.94％和為109.39％.結果錶明,採用所製備的多剋隆抗體而建立的草甘膦ciELISA方法可有效地應用于玉米粉和小麥粉中草甘膦的殘留檢測.
통과탄화이아알법장초감련(Glyphosate,GLY)분별여란청단백(OVA)화우혈청백단백(BSA)우련제비면역원화포피원.기질보조격광해석전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)검측표명,초감련여우혈청백단백화란청단백적우련비분별위11∶1화9∶1.합성적면역원작용신서란대백토제비출초감련다극륭항체,ELISA검측항체용액효개위1∶1×107,해항체불여초감련적결구유사물증감련화쌍감련기교차반응.이차항체건립료초감련간접경쟁ELISA검측방법(ciELISA),기선성범위위0.78～100 μg/mL,선성회귀방정위y=15.851 0 lnx+7.780 5,R2=0.993 8.초감련적검측한위IC10=1.15μg/mL,IC50=14.35 μg/mL.재첨가회수시험중,초감련첨가치5화10 μg/g시,옥미분중적초감련회수솔위104.12％화81.37％,소맥분중적회수솔칙분별위118.94％화위109.39％.결과표명,채용소제비적다극륭항체이건립적초감련ciELISA방법가유효지응용우옥미분화소맥분중초감련적잔류검측.
