CAJ | 학술논문

与其它微生物相比,用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势,但大肠杆菌没有L-乳酸脱氢酶基因,不能利用糖发酵生产L-乳酸.本文采用PCR技术,以乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)基因组DNA为模板,克隆得到L-乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase)基因,将该基因的ORF连接到表达质粒pET-22b(+),获得重组质粒pET-ldhL.将pET-ldhL质粒转化大肠杆菌BL21株,实现了ldhL基因的表达;对含有ldhL基因的重组菌株进行表达研究,在30℃以IPTG诱导8h后,SDS-PAGE分析可见明显特异性条带,酶活力达到6.49 u/mL,是野生菌酶活力(2.82u/mL)的2.3倍.对重组表达的L-乳酸脱氢酶生物学特性研究显示,它们的最适反应温度为27～30℃,最适反应pH为5.0～5.3.图5参15
여기타미생물상비,용대장간균진행발효생산유산유허다우세,단대장간균몰유L-유산탈경매기인,불능이용당발효생산L-유산.본문채용PCR기술,이유산편구균(Pediococcus acidilactici)기인조DNA위모판,극륭득도L-유산탈경매(L-lactate dehydrogenase)기인,장해기인적ORF련접도표체질립pET-22b(+),획득중조질립pET-ldhL.장pET-ldhL질립전화대장간균BL21주,실현료ldhL기인적표체;대함유ldhL기인적중조균주진행표체연구,재30℃이IPTG유도8h후,SDS-PAGE분석가견명현특이성조대,매활력체도6.49 u/mL,시야생균매활력(2.82u/mL)적2.3배.대중조표체적L-유산탈경매생물학특성연구현시,타문적최괄반응온도위27～30℃,최괄반응pH위5.0～5.3.도5삼15