扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2011年
4期
1-6
,共6页
和祯泉%刘天健%吕英军%鲍恩东
和禎泉%劉天健%呂英軍%鮑恩東
화정천%류천건%려영군%포은동
Fowlicidin-3%抗菌肽%融合表达%抑菌试验
Fowlicidin-3%抗菌肽%融閤錶達%抑菌試驗
Fowlicidin-3%항균태%융합표체%억균시험
根据抗菌肽Fowlicidin-3氨基酸序列,选用大肠杆菌(Escherichia coli)偏嗜密码子,设计合成117 bp的Fowlicidin-3a和102 bp的Fowlicidin-3b基因.将这2个基因克隆到突变载体,构建出表达载体pET-32 a-C-Fowlicidin-3a和pET-32a-Tev-C-Fowlicidin-3b,分别转化至E.coli BL21 Rosetta-2中,IPTG诱导表达融合蛋白Trx-Fowlicidin-3a和Trx-Fowlicidin-3b并进行纯化.结果表明:肠激酶裂解Trx-Fowlicidin-3a和Tev酶裂解Trx-Fowlicidin-3b效率都较高,获得的裂解液都对指示菌E.coli DH5α显示出抑菌活性.Fowlicidin-3a和Fowlicidin-3b对指示菌E.coli DH5α的最小抑菌浓度均为2 μg·mL-1.
根據抗菌肽Fowlicidin-3氨基痠序列,選用大腸桿菌(Escherichia coli)偏嗜密碼子,設計閤成117 bp的Fowlicidin-3a和102 bp的Fowlicidin-3b基因.將這2箇基因剋隆到突變載體,構建齣錶達載體pET-32 a-C-Fowlicidin-3a和pET-32a-Tev-C-Fowlicidin-3b,分彆轉化至E.coli BL21 Rosetta-2中,IPTG誘導錶達融閤蛋白Trx-Fowlicidin-3a和Trx-Fowlicidin-3b併進行純化.結果錶明:腸激酶裂解Trx-Fowlicidin-3a和Tev酶裂解Trx-Fowlicidin-3b效率都較高,穫得的裂解液都對指示菌E.coli DH5α顯示齣抑菌活性.Fowlicidin-3a和Fowlicidin-3b對指示菌E.coli DH5α的最小抑菌濃度均為2 μg·mL-1.
근거항균태Fowlicidin-3안기산서렬,선용대장간균(Escherichia coli)편기밀마자,설계합성117 bp적Fowlicidin-3a화102 bp적Fowlicidin-3b기인.장저2개기인극륭도돌변재체,구건출표체재체pET-32 a-C-Fowlicidin-3a화pET-32a-Tev-C-Fowlicidin-3b,분별전화지E.coli BL21 Rosetta-2중,IPTG유도표체융합단백Trx-Fowlicidin-3a화Trx-Fowlicidin-3b병진행순화.결과표명:장격매렬해Trx-Fowlicidin-3a화Tev매렬해Trx-Fowlicidin-3b효솔도교고,획득적렬해액도대지시균E.coli DH5α현시출억균활성.Fowlicidin-3a화Fowlicidin-3b대지시균E.coli DH5α적최소억균농도균위2 μg·mL-1.
