中国骨质疏松杂志
中國骨質疏鬆雜誌
중국골질소송잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
2011年
5期
378-381
,共4页
孙继芾%沈铁城%黄永辉%江红卫
孫繼芾%瀋鐵城%黃永輝%江紅衛
손계비%침철성%황영휘%강홍위
M-CSF%RANKL%破骨细胞%细胞培养
M-CSF%RANKL%破骨細胞%細胞培養
M-CSF%RANKL%파골세포%세포배양
目的 以巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)和核因子kB受体激动剂配体(Ligand of receptor activator of NF-kB,RANKL)联合体外诱导小鼠骨髓干细胞分化为破骨样细胞,并对其骨吸收功能进行动态观察.方法 分离小鼠四肢骨获取骨髓干细胞,以M-CSF和RANKL诱导培养,将盖玻片及骨磨片置人培养基内,在诱导培养的第3,6,9天分别对盖玻片行抗酒石酸酸性磷酸酶(The tartrate-resistant acid phosphatase TRAP)染色,观察细胞形态和染色情况,并计算破骨样细胞数量;同时对骨磨片进行骨吸收陷窝的观察.结果 诱导培养3 d后出现含TRAP(+)颗粒的细胞,可见淡染单核和双核;诱导培养6 d后可见TRAP(+)细胞较诱导培养3 d时增多,仍以双核为主;诱导培养9 d后出现多核巨型TRAP(+)细胞,细胞核达到3个以上.并且随着诱导培养的时间延长,破骨样细胞数量逐渐增长.诱导培养第3,6天骨磨片上均未发现骨吸收陷窝,第九天出现不同形态的呈蓝紫色的吸收陷窝.结论 M-CSF和RANKL联合体外诱导小鼠骨髓干细胞形成破骨样细胞是一种有效的诱导培养方法,本实验在诱导培养第九天发现破骨样细胞具有骨吸收功能.
目的 以巨噬細胞集落刺激因子(Macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)和覈因子kB受體激動劑配體(Ligand of receptor activator of NF-kB,RANKL)聯閤體外誘導小鼠骨髓榦細胞分化為破骨樣細胞,併對其骨吸收功能進行動態觀察.方法 分離小鼠四肢骨穫取骨髓榦細胞,以M-CSF和RANKL誘導培養,將蓋玻片及骨磨片置人培養基內,在誘導培養的第3,6,9天分彆對蓋玻片行抗酒石痠痠性燐痠酶(The tartrate-resistant acid phosphatase TRAP)染色,觀察細胞形態和染色情況,併計算破骨樣細胞數量;同時對骨磨片進行骨吸收陷窩的觀察.結果 誘導培養3 d後齣現含TRAP(+)顆粒的細胞,可見淡染單覈和雙覈;誘導培養6 d後可見TRAP(+)細胞較誘導培養3 d時增多,仍以雙覈為主;誘導培養9 d後齣現多覈巨型TRAP(+)細胞,細胞覈達到3箇以上.併且隨著誘導培養的時間延長,破骨樣細胞數量逐漸增長.誘導培養第3,6天骨磨片上均未髮現骨吸收陷窩,第九天齣現不同形態的呈藍紫色的吸收陷窩.結論 M-CSF和RANKL聯閤體外誘導小鼠骨髓榦細胞形成破骨樣細胞是一種有效的誘導培養方法,本實驗在誘導培養第九天髮現破骨樣細胞具有骨吸收功能.
목적 이거서세포집락자격인자(Macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)화핵인자kB수체격동제배체(Ligand of receptor activator of NF-kB,RANKL)연합체외유도소서골수간세포분화위파골양세포,병대기골흡수공능진행동태관찰.방법 분리소서사지골획취골수간세포,이M-CSF화RANKL유도배양,장개파편급골마편치인배양기내,재유도배양적제3,6,9천분별대개파편행항주석산산성린산매(The tartrate-resistant acid phosphatase TRAP)염색,관찰세포형태화염색정황,병계산파골양세포수량;동시대골마편진행골흡수함와적관찰.결과 유도배양3 d후출현함TRAP(+)과립적세포,가견담염단핵화쌍핵;유도배양6 d후가견TRAP(+)세포교유도배양3 d시증다,잉이쌍핵위주;유도배양9 d후출현다핵거형TRAP(+)세포,세포핵체도3개이상.병차수착유도배양적시간연장,파골양세포수량축점증장.유도배양제3,6천골마편상균미발현골흡수함와,제구천출현불동형태적정람자색적흡수함와.결론 M-CSF화RANKL연합체외유도소서골수간세포형성파골양세포시일충유효적유도배양방법,본실험재유도배양제구천발현파골양세포구유골흡수공능.
