RNAi沉默HMGN5基因对肺癌A549细胞增殖的影响
RNAi침묵HMGN5기인대폐암A549세포증식적영향
Experimental study of the effect of RNAi to silence HMGN5 gene expression on proliferation of A549 cells
  • 万方数据
    中国老年学杂志 중국노년학잡지
    CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
    2011年 1期 49-51 ,共3页

    陈鹏%马忠森%王秀丽%于庭%胡娱新%郏博%刘锋%石莹%詹婧

    진붕%마충삼%왕수려%우정%호오신%겹박%류봉%석형%첨청

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    RNAi%HMGN5%폐암%세포증식
    目的 构建HMGN5基因的shRNA慢病毒载体,并在肺癌A549细胞上鉴定其沉默效率,观察其对细胞增殖能力的影响.方法 筛选HMGN5基因特异性siRNA靶点,合成短发卡结构shRNA,与LentiLox 3.7慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,包装shRNA慢病毒颗粒,感染肺癌A549细胞,设阴性组及干涉组,应用Real-time PCR和Western印迹的方法检测HMGN5在mRNA和蛋白水平的沉默效率,MTT和克隆形成实验观察HMGN5基因沉默对A549细胞增殖的影响.结果 构建的shRNA慢病毒颗粒感染A549细胞后,干涉组HMGN5基因的mRNA表达量较阴性对照载体慢病毒感染组下降了71.7%,显著抑制其蛋白表达;MTT结果表明细胞增殖能力明显降低,干涉组克隆形成能力较阴性组明显减弱.结论 成功构建了HMGN5基因的shRNA慢病毒表达载体,其能够在肺癌A549细胞上有效沉默靶基因.HMGN5基因具有影响肺癌细胞恶性增殖的能力,为肺癌的基因治疗奠定了实验基础.
    목적 구건HMGN5기인적shRNA만병독재체,병재폐암A549세포상감정기침묵효솔,관찰기대세포증식능력적영향.방법 사선HMGN5기인특이성siRNA파점,합성단발잡결구shRNA,여LentiLox 3.7만병독재체중조형성shRNA표체재체,포장shRNA만병독과립,감염폐암A549세포,설음성조급간섭조,응용Real-time PCR화Western인적적방법검측HMGN5재mRNA화단백수평적침묵효솔,MTT화극륭형성실험관찰HMGN5기인침묵대A549세포증식적영향.결과 구건적shRNA만병독과립감염A549세포후,간섭조HMGN5기인적mRNA표체량교음성대조재체만병독감염조하강료71.7%,현저억제기단백표체;MTT결과표명세포증식능력명현강저,간섭조극륭형성능력교음성조명현감약.결론 성공구건료HMGN5기인적shRNA만병독표체재체,기능구재폐암A549세포상유효침묵파기인.HMGN5기인구유영향폐암세포악성증식적능력,위폐암적기인치료전정료실험기출.
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