CAJ | 학술논문

Neuregulin-1(NRG1, 纽兰格林)通过活化ErbB2/ErbB4二聚体具有治疗心衰的作用, 目前已完成临床二期.为避免作为心衰治疗药物时同时激活ErbB3并产生副作用, 因此用NRG1变异体的方法寻找能对ErbB4专一性激活的配体.文章构建了带有不同筛选标记的ErbB2、ErbB3、ErbB4细胞表达质粒, 将ErbB2/ErbB3、ErbB2/ErbB4质粒共转染至CHO细胞, 建立了ErbB2/ErbB3特异性表达和ErbB2/ErbB4特异性表达的细胞株.通过与新生大鼠原代心肌细胞比较, 证明ErbB2/ErbB4细胞株信号传导功能与心肌细胞相似, NRG1可以激活下游的AKT信号途径、PI3K信号途径, 并表现出良好的剂量效应.因此可以通过检测与心肌功能密切相关的下游信号AKT磷酸化水平快速筛选抗心衰药物, 并通过与ErbB2/ErbB3信号激活水平比较鉴定其对心肌细胞的特异性.文章还构建了31个不同的NRG1突变体并在大肠杆菌中成功的表达和纯化.将这些突变体用于刺激两个细胞株, 通过检测AKT磷酸化水平, 发现这些突变体对ErbB2/ErbB3与ErbB2/ErbB4受体的激活能力不同.进一步检测其中5个ErbB2/ErbB4激活特异性发生改变的突变体与两对受体的亲和力, 发现这些突变体和ErbB2/ErbB4与ErbB2/ErbB3受体亲和力的变化有一致性.最终筛选到了4个可以更特异性激活ErbB2/ErbB4受体的突变体作为更有效治疗心衰的候选药物.
Neuregulin-1(NRG1, 뉴란격림)통과활화ErbB2/ErbB4이취체구유치료심쇠적작용, 목전이완성림상이기.위피면작위심쇠치료약물시동시격활ErbB3병산생부작용, 인차용NRG1변이체적방법심조능대ErbB4전일성격활적배체.문장구건료대유불동사선표기적ErbB2、ErbB3、ErbB4세포표체질립, 장ErbB2/ErbB3、ErbB2/ErbB4질립공전염지CHO세포, 건립료ErbB2/ErbB3특이성표체화ErbB2/ErbB4특이성표체적세포주.통과여신생대서원대심기세포비교, 증명ErbB2/ErbB4세포주신호전도공능여심기세포상사, NRG1가이격활하유적AKT신호도경、PI3K신호도경, 병표현출량호적제량효응.인차가이통과검측여심기공능밀절상관적하유신호AKT린산화수평쾌속사선항심쇠약물, 병통과여ErbB2/ErbB3신호격활수평비교감정기대심기세포적특이성.문장환구건료31개불동적NRG1돌변체병재대장간균중성공적표체화순화.장저사돌변체용우자격량개세포주, 통과검측AKT린산화수평, 발현저사돌변체대ErbB2/ErbB3여ErbB2/ErbB4수체적격활능력불동.진일보검측기중5개ErbB2/ErbB4격활특이성발생개변적돌변체여량대수체적친화력, 발현저사돌변체화ErbB2/ErbB4여ErbB2/ErbB3수체친화력적변화유일치성.최종사선도료4개가이경특이성격활ErbB2/ErbB4수체적돌변체작위경유효치료심쇠적후선약물.