中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
8期
54-56
,共3页
田甜%寨鸿瑞%刘若余%王兆龙
田甜%寨鴻瑞%劉若餘%王兆龍
전첨%채홍서%류약여%왕조룡
β-酪蛋白基因%克隆%cDNA%乳腺特异表达
β-酪蛋白基因%剋隆%cDNA%乳腺特異錶達
β-락단백기인%극륭%cDNA%유선특이표체
利用高保真PCR法,分别扩增了牛乳腺β-酪蛋白基因的1.8和1.1 kh的5'和3'调控序列,将其分别克隆入TA载体.经PCR验证后测序,用NCBI Blast软件分析表明其克隆片断与奶牛β-酪蛋白基因相应区域同源性分别为97.0%和99.0%,表明成功克隆了酪蛋白基因5'和3'的调控区.然后利用DNA重组技术依次亚克隆人改造过的真核表达载体pcDNA3(切除CMV启动子),构建成牛乳腺特异表达载体.获得的重组载体经限制性内切酶酶切鉴定,测序验证等表明,成功构建了牛乳腺特异表达载体.
利用高保真PCR法,分彆擴增瞭牛乳腺β-酪蛋白基因的1.8和1.1 kh的5'和3'調控序列,將其分彆剋隆入TA載體.經PCR驗證後測序,用NCBI Blast軟件分析錶明其剋隆片斷與奶牛β-酪蛋白基因相應區域同源性分彆為97.0%和99.0%,錶明成功剋隆瞭酪蛋白基因5'和3'的調控區.然後利用DNA重組技術依次亞剋隆人改造過的真覈錶達載體pcDNA3(切除CMV啟動子),構建成牛乳腺特異錶達載體.穫得的重組載體經限製性內切酶酶切鑒定,測序驗證等錶明,成功構建瞭牛乳腺特異錶達載體.
이용고보진PCR법,분별확증료우유선β-락단백기인적1.8화1.1 kh적5'화3'조공서렬,장기분별극륭입TA재체.경PCR험증후측서,용NCBI Blast연건분석표명기극륭편단여내우β-락단백기인상응구역동원성분별위97.0%화99.0%,표명성공극륭료락단백기인5'화3'적조공구.연후이용DNA중조기술의차아극륭인개조과적진핵표체재체pcDNA3(절제CMV계동자),구건성우유선특이표체재체.획득적중조재체경한제성내절매매절감정,측서험증등표명,성공구건료우유선특이표체재체.
