中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2009年
6期
534-538
,共5页
潘智华%何蔼%程梅%李卓雅%于彦杰%贺华良%詹希美
潘智華%何藹%程梅%李卓雅%于彥傑%賀華良%詹希美
반지화%하애%정매%리탁아%우언걸%하화량%첨희미
广州管圆线虫%半胱氨酸蛋白酶抑制剂%分子克隆%免疫保护
廣州管圓線蟲%半胱氨痠蛋白酶抑製劑%分子剋隆%免疫保護
엄주관원선충%반광안산단백매억제제%분자극륭%면역보호
目的 对广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)基因进行克隆、原核表达,并对表达产物的免疫保护作用作出初步鉴定.方法 将广州管圆线虫cystatin基因克隆入载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达.用纯化融合蛋白隔周免疫小鼠1次,共3次,设GST免疫及未免疫对照组,末次免疫后1w用广州管圆线虫Ⅲ期幼虫攻击感染,3w后剖杀小鼠,计算减虫率及保护率,并测定小鼠特异性IgG抗体水平变化.结果 成功构建了pGEX-4T-1/cystatin重组表达质粒,并在大肠杆菌中得以高效可溶性表达,融合蛋白免疫小鼠后诱导产生了58.1%的减虫率及20%的保护率,与对照组相比减虫效果显著(P<0.01).结论 广州管圆线虫cystatin基因能在大肠杆菌中高效表达并可诱导小鼠产生一定水平的保护性免疫力.
目的 對廣州管圓線蟲半胱氨痠蛋白酶抑製劑(cystatin)基因進行剋隆、原覈錶達,併對錶達產物的免疫保護作用作齣初步鑒定.方法 將廣州管圓線蟲cystatin基因剋隆入載體pGEX-4T-1中,轉化大腸桿菌BL21進行誘導錶達.用純化融閤蛋白隔週免疫小鼠1次,共3次,設GST免疫及未免疫對照組,末次免疫後1w用廣州管圓線蟲Ⅲ期幼蟲攻擊感染,3w後剖殺小鼠,計算減蟲率及保護率,併測定小鼠特異性IgG抗體水平變化.結果 成功構建瞭pGEX-4T-1/cystatin重組錶達質粒,併在大腸桿菌中得以高效可溶性錶達,融閤蛋白免疫小鼠後誘導產生瞭58.1%的減蟲率及20%的保護率,與對照組相比減蟲效果顯著(P<0.01).結論 廣州管圓線蟲cystatin基因能在大腸桿菌中高效錶達併可誘導小鼠產生一定水平的保護性免疫力.
목적 대엄주관원선충반광안산단백매억제제(cystatin)기인진행극륭、원핵표체,병대표체산물적면역보호작용작출초보감정.방법 장엄주관원선충cystatin기인극륭입재체pGEX-4T-1중,전화대장간균BL21진행유도표체.용순화융합단백격주면역소서1차,공3차,설GST면역급미면역대조조,말차면역후1w용엄주관원선충Ⅲ기유충공격감염,3w후부살소서,계산감충솔급보호솔,병측정소서특이성IgG항체수평변화.결과 성공구건료pGEX-4T-1/cystatin중조표체질립,병재대장간균중득이고효가용성표체,융합단백면역소서후유도산생료58.1%적감충솔급20%적보호솔,여대조조상비감충효과현저(P<0.01).결론 엄주관원선충cystatin기인능재대장간균중고효표체병가유도소서산생일정수평적보호성면역력.
