CAJ | 학술논문

试验采用Trizol一次法提取猪精子和睾丸组织的总RNA,然后通过RT-PCR扩增的方法,检测精子和睾丸组织中Protamine-1(PRM-1)、Protamine-2(PRM-2)、Clusterin、Heat shock protein 90(HSP90)、C-myc基因的mR-NA是否存在;通过不同精子数量的使用,检测在本试验条件下扩增出清晰PRM-1带所需要的适宜精子数量;通过琼脂糖电泳检测精子与睾丸组织RNA的电泳特征.结果,猪睾丸组织中有PRM-1、PRM-2、Clusterin、HSP90、C-myc的mRNA,而射出的猪精子(上游处理)本试验只检测出PRM-1的mRNA;在使用RNA沉淀剂时,3.0×107～6.5×107精子可得到清晰的PRM-1条带;本试验首次得到猪精子总RNA的普通琼脂糖胶电泳图.初步研究的结果表明:射出猪精子中存在的RNA种类与睾丸组织中存在的RNA种类差异大;猪精子RNA的18S和28S片段与睾丸组织无明显差异.猪精子的RNA需要更多的研究.
시험채용Trizol일차법제취저정자화고환조직적총RNA,연후통과RT-PCR확증적방법,검측정자화고환조직중Protamine-1(PRM-1)、Protamine-2(PRM-2)、Clusterin、Heat shock protein 90(HSP90)、C-myc기인적mR-NA시부존재;통과불동정자수량적사용,검측재본시험조건하확증출청석PRM-1대소수요적괄의정자수량;통과경지당전영검측정자여고환조직RNA적전영특정.결과,저고환조직중유PRM-1、PRM-2、Clusterin、HSP90、C-myc적mRNA,이사출적저정자(상유처리)본시험지검측출PRM-1적mRNA;재사용RNA침정제시,3.0×107～6.5×107정자가득도청석적PRM-1조대;본시험수차득도저정자총RNA적보통경지당효전영도.초보연구적결과표명:사출저정자중존재적RNA충류여고환조직중존재적RNA충류차이대;저정자RNA적18S화28S편단여고환조직무명현차이.저정자적RNA수요경다적연구.