CAJ | 학술논문

目的:获得P11-A1融合蛋白并对融合蛋白的生物活性进行分析.方法:将人类栽脂蛋白A1和P11基因进行拼接.然后连接在表达载体pBV220上,将表达载体转化到大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE分析其表达情况.通过离子交换层析对融合蛋白进行纯化、Western印迹检测纯化产物.用液体闪烁计数器检测融合蛋白体外合成高密度脂蛋白(HDL)的能力来测定转酯活性,同时用溶圈法检测融合蛋白的溶栓活性.结果:融合蛋白的表达量为29%;离子交换层析获得纯度约为90%的蛋白;Western印迹显示该重组蛋白能够特异地识别载脂蛋白A1抗体,并且该融合蛋白在浓度为0.28 mg/ml时转酯活性为21.93 nmol/(h·ml),溶栓活性为22.2 U/mg.结论:成功获得具有转酯活性和溶栓功能的P11-A1融合蛋白.
목적:획득P11-A1융합단백병대융합단백적생물활성진행분석.방법:장인류재지단백A1화P11기인진행병접.연후련접재표체재체pBV220상,장표체재체전화도대장간균BL21진행표체,SDS-PAGE분석기표체정황.통과리자교환층석대융합단백진행순화、Western인적검측순화산물.용액체섬삭계수기검측융합단백체외합성고밀도지단백(HDL)적능력래측정전지활성,동시용용권법검측융합단백적용전활성.결과:융합단백적표체량위29%;리자교환층석획득순도약위90%적단백;Western인적현시해중조단백능구특이지식별재지단백A1항체,병차해융합단백재농도위0.28 mg/ml시전지활성위21.93 nmol/(h·ml),용전활성위22.2 U/mg.결론:성공획득구유전지활성화용전공능적P11-A1융합단백.