中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2008年
11期
22-25
,共4页
朱吕昌%陈义平%李明义%郭玉广%马爽%周洁
硃呂昌%陳義平%李明義%郭玉廣%馬爽%週潔
주려창%진의평%리명의%곽옥엄%마상%주길
猪胸膜肺炎放线杆菌%多杀性巴氏杆菌%副猪嗜血杆菌%复合PCR
豬胸膜肺炎放線桿菌%多殺性巴氏桿菌%副豬嗜血桿菌%複閤PCR
저흉막폐염방선간균%다살성파씨간균%부저기혈간균%복합PCR
目的 建立可以同时检测猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的快速而可靠的PCR检测方法.方法和结果 根据胸膜肺炎放线杆菌的Apx-VIA基因序列、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的16SrKNA基因序列设计5条引物.猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌模板的PCR扩增产物大小分别为342bp,485bp和1258bp.复合PCR对1～12型猪胸膜肺炎放线杆菌标准株,6株多杀性巴氏杆菌标准株,1～15型副猪嗜血杆菌以及25株经生化鉴定确认为上述三种细菌的分离株的基因组DNA作为模板进行检测,均获得预期大小的扩增产物.以猪放线杆菌、吲哚放线杆菌等14种常见细菌作为阴性对照进行PCR检测,结果仅有支气管败血波氏杆菌产生了可以和上述三个特异性条带明显区分的PCK产物.复合PCR针对胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的敏感性分别为14pg、34pg和37pg.结论 本研究建立的复合PCR特异性好,敏感性高.可以用于猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的快速检测.
目的 建立可以同時檢測豬胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌的快速而可靠的PCR檢測方法.方法和結果 根據胸膜肺炎放線桿菌的Apx-VIA基因序列、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌的16SrKNA基因序列設計5條引物.豬胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌模闆的PCR擴增產物大小分彆為342bp,485bp和1258bp.複閤PCR對1～12型豬胸膜肺炎放線桿菌標準株,6株多殺性巴氏桿菌標準株,1～15型副豬嗜血桿菌以及25株經生化鑒定確認為上述三種細菌的分離株的基因組DNA作為模闆進行檢測,均穫得預期大小的擴增產物.以豬放線桿菌、吲哚放線桿菌等14種常見細菌作為陰性對照進行PCR檢測,結果僅有支氣管敗血波氏桿菌產生瞭可以和上述三箇特異性條帶明顯區分的PCK產物.複閤PCR針對胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌的敏感性分彆為14pg、34pg和37pg.結論 本研究建立的複閤PCR特異性好,敏感性高.可以用于豬胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌的快速檢測.
목적 건립가이동시검측저흉막폐염방선간균、다살성파씨간균화부저기혈간균적쾌속이가고적PCR검측방법.방법화결과 근거흉막폐염방선간균적Apx-VIA기인서렬、다살성파씨간균화부저기혈간균적16SrKNA기인서렬설계5조인물.저흉막폐염방선간균、다살성파씨간균화부저기혈간균모판적PCR확증산물대소분별위342bp,485bp화1258bp.복합PCR대1～12형저흉막폐염방선간균표준주,6주다살성파씨간균표준주,1～15형부저기혈간균이급25주경생화감정학인위상술삼충세균적분리주적기인조DNA작위모판진행검측,균획득예기대소적확증산물.이저방선간균、신타방선간균등14충상견세균작위음성대조진행PCR검측,결과부유지기관패혈파씨간균산생료가이화상술삼개특이성조대명현구분적PCK산물.복합PCR침대흉막폐염방선간균、다살성파씨간균화부저기혈간균적민감성분별위14pg、34pg화37pg.결론 본연구건립적복합PCR특이성호,민감성고.가이용우저흉막폐염방선간균、다살성파씨간균화부저기혈간균적쾌속검측.
