农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
154-157
,共4页
张建峰%蒋宗勇%唐兆新%王贵平%余永鹏%魏文康%李春玲
張建峰%蔣宗勇%唐兆新%王貴平%餘永鵬%魏文康%李春玲
장건봉%장종용%당조신%왕귀평%여영붕%위문강%리춘령
α螺旋抗菌肽模式肽%两亲性%毕赤酵母%分泌表达
α螺鏇抗菌肽模式肽%兩親性%畢赤酵母%分泌錶達
α라선항균태모식태%량친성%필적효모%분비표체
在α-螺旋抗菌肽序列比较和两亲性分析的基础上,提取序列模板,计算机辅助(螺旋轮法)设计出新型抗菌肽模式肽PGYa(peptide以Gly开头,以Tyr-NH2结尾),然后选用毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱密码子,设计合成了PGYa基因(rPCR法).所合成的基因全长为94 bp,并在其N端引入Kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端.基因克隆人pPICZα-A质粒,构建分泌型酵母表达载体pPICZα-A-PGYa.在AOX1(醇氧化酶)启动子调控下,PGYa蛋白获得分泌表达,其分子量约为2.8 kD.初步抑菌(Escherichia coli DH5α)活性显示,PGYa有较好的抗菌活性.
在α-螺鏇抗菌肽序列比較和兩親性分析的基礎上,提取序列模闆,計算機輔助(螺鏇輪法)設計齣新型抗菌肽模式肽PGYa(peptide以Gly開頭,以Tyr-NH2結尾),然後選用畢赤酵母(Pichia pastoris)偏愛密碼子,設計閤成瞭PGYa基因(rPCR法).所閤成的基因全長為94 bp,併在其N耑引入Kex2裂解位點,以保證錶達抗菌肽具有天然N耑.基因剋隆人pPICZα-A質粒,構建分泌型酵母錶達載體pPICZα-A-PGYa.在AOX1(醇氧化酶)啟動子調控下,PGYa蛋白穫得分泌錶達,其分子量約為2.8 kD.初步抑菌(Escherichia coli DH5α)活性顯示,PGYa有較好的抗菌活性.
재α-라선항균태서렬비교화량친성분석적기출상,제취서렬모판,계산궤보조(라선륜법)설계출신형항균태모식태PGYa(peptide이Gly개두,이Tyr-NH2결미),연후선용필적효모(Pichia pastoris)편애밀마자,설계합성료PGYa기인(rPCR법).소합성적기인전장위94 bp,병재기N단인입Kex2렬해위점,이보증표체항균태구유천연N단.기인극륭인pPICZα-A질립,구건분비형효모표체재체pPICZα-A-PGYa.재AOX1(순양화매)계동자조공하,PGYa단백획득분비표체,기분자량약위2.8 kD.초보억균(Escherichia coli DH5α)활성현시,PGYa유교호적항균활성.
