中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2008年
3期
53-58
,共6页
杨书慧%赵胜军%刘军%闫达中%易丹
楊書慧%趙勝軍%劉軍%閆達中%易丹
양서혜%조성군%류군%염체중%역단
甜蛋白Monellin%乳糖%诱导表达%优化
甜蛋白Monellin%乳糖%誘導錶達%優化
첨단백Monellin%유당%유도표체%우화
根据已报道的单链Monellin甜蛋白的氨基酸序列,按大肠杆菌基因偏爱密码子,设计和人工合成了单链monellin基因.将单链monellin基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建了重组表达载体pET28a-mon,转化大肠杆菌BL21(DE3),得到表达Monellin的大肠杆菌工程菌株.借助SDS-PAGE分析方法,研究了乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌表达甜蛋白Monellin.通过对乳糖作为诱导剂表达条件进行优化,Monellin的表达量可占细胞总蛋白的33.09%,与IPTG诱导表达量接近.为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌生产甜蛋白Monellin提供了参考依据.
根據已報道的單鏈Monellin甜蛋白的氨基痠序列,按大腸桿菌基因偏愛密碼子,設計和人工閤成瞭單鏈monellin基因.將單鏈monellin基因剋隆到大腸桿菌錶達載體pET-28a中,構建瞭重組錶達載體pET28a-mon,轉化大腸桿菌BL21(DE3),得到錶達Monellin的大腸桿菌工程菌株.藉助SDS-PAGE分析方法,研究瞭乳糖代替IPTG誘導大腸桿菌錶達甜蛋白Monellin.通過對乳糖作為誘導劑錶達條件進行優化,Monellin的錶達量可佔細胞總蛋白的33.09%,與IPTG誘導錶達量接近.為乳糖作為誘導劑應用于重組大腸桿菌生產甜蛋白Monellin提供瞭參攷依據.
근거이보도적단련Monellin첨단백적안기산서렬,안대장간균기인편애밀마자,설계화인공합성료단련monellin기인.장단련monellin기인극륭도대장간균표체재체pET-28a중,구건료중조표체재체pET28a-mon,전화대장간균BL21(DE3),득도표체Monellin적대장간균공정균주.차조SDS-PAGE분석방법,연구료유당대체IPTG유도대장간균표체첨단백Monellin.통과대유당작위유도제표체조건진행우화,Monellin적표체량가점세포총단백적33.09%,여IPTG유도표체량접근.위유당작위유도제응용우중조대장간균생산첨단백Monellin제공료삼고의거.
