中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2007年
6期
511-515
,共5页
丁永霞%王树军%张勇%张惠珍%王颖%金姝%沈天伟%葛瑜%葛海良
丁永霞%王樹軍%張勇%張惠珍%王穎%金姝%瀋天偉%葛瑜%葛海良
정영하%왕수군%장용%장혜진%왕영%금주%침천위%갈유%갈해량
肿瘤相关抗原线粒体蛋白12基因%siRNA%HeLa细胞%线粒体%凋亡
腫瘤相關抗原線粒體蛋白12基因%siRNA%HeLa細胞%線粒體%凋亡
종류상관항원선립체단백12기인%siRNA%HeLa세포%선립체%조망
目的:探讨肿瘤相关抗原线粒体蛋白质12基因(tumor-associated antigen mitochondrial protein 12 gene,TAMP12)表达变化对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用.方法:利用计算机辅助设计并化学合成3对针对TAMP12的siRNA片段,通过脂质体法将siRNA转染于TAMP12高表达的HeLa细胞中,筛选有效的siRNA片段.以RT-PCR、实时定量PCR及流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞TAMP12 mRNA及蛋白表达的变化.以激光扫描共聚焦显微镜(confocal lyser scarning microscope,CLSM)观察双色荧光标记蛋白的亚细胞定位和定量表达.以3H-TdR掺入实验和FCM检测阻断TAMP12基因表达对HeLa细胞增殖和凋亡的影响.结果:CLSM检测显示TAMP12蛋白主要表达在HeLa细胞线粒体中.转染siRNA-TAMP12的肿瘤细胞中TAMP12 mRNA及蛋白的表达显著降低,与对照组对比,抑制率分别为81%和87%(P<0.01);转染细胞的DNA合成受抑制,抑制率达42%(P<0.01);转染siRNA-TAMP12肿瘤细胞的凋亡率由对照细胞的8.14%上升到15.59%(P<0.01).结论:RNA干扰可阻断TAMP12基因的表达,从而对人宫颈癌Hela细胞产生抑制作用.
目的:探討腫瘤相關抗原線粒體蛋白質12基因(tumor-associated antigen mitochondrial protein 12 gene,TAMP12)錶達變化對人宮頸癌HeLa細胞的抑製作用.方法:利用計算機輔助設計併化學閤成3對針對TAMP12的siRNA片段,通過脂質體法將siRNA轉染于TAMP12高錶達的HeLa細胞中,篩選有效的siRNA片段.以RT-PCR、實時定量PCR及流式細胞術(FCM)檢測腫瘤細胞TAMP12 mRNA及蛋白錶達的變化.以激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal lyser scarning microscope,CLSM)觀察雙色熒光標記蛋白的亞細胞定位和定量錶達.以3H-TdR摻入實驗和FCM檢測阻斷TAMP12基因錶達對HeLa細胞增殖和凋亡的影響.結果:CLSM檢測顯示TAMP12蛋白主要錶達在HeLa細胞線粒體中.轉染siRNA-TAMP12的腫瘤細胞中TAMP12 mRNA及蛋白的錶達顯著降低,與對照組對比,抑製率分彆為81%和87%(P<0.01);轉染細胞的DNA閤成受抑製,抑製率達42%(P<0.01);轉染siRNA-TAMP12腫瘤細胞的凋亡率由對照細胞的8.14%上升到15.59%(P<0.01).結論:RNA榦擾可阻斷TAMP12基因的錶達,從而對人宮頸癌Hela細胞產生抑製作用.
목적:탐토종류상관항원선립체단백질12기인(tumor-associated antigen mitochondrial protein 12 gene,TAMP12)표체변화대인궁경암HeLa세포적억제작용.방법:이용계산궤보조설계병화학합성3대침대TAMP12적siRNA편단,통과지질체법장siRNA전염우TAMP12고표체적HeLa세포중,사선유효적siRNA편단.이RT-PCR、실시정량PCR급류식세포술(FCM)검측종류세포TAMP12 mRNA급단백표체적변화.이격광소묘공취초현미경(confocal lyser scarning microscope,CLSM)관찰쌍색형광표기단백적아세포정위화정량표체.이3H-TdR참입실험화FCM검측조단TAMP12기인표체대HeLa세포증식화조망적영향.결과:CLSM검측현시TAMP12단백주요표체재HeLa세포선립체중.전염siRNA-TAMP12적종류세포중TAMP12 mRNA급단백적표체현저강저,여대조조대비,억제솔분별위81%화87%(P<0.01);전염세포적DNA합성수억제,억제솔체42%(P<0.01);전염siRNA-TAMP12종류세포적조망솔유대조세포적8.14%상승도15.59%(P<0.01).결론:RNA간우가조단TAMP12기인적표체,종이대인궁경암Hela세포산생억제작용.
