细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
12期
1117-1118,1121
,共3页
李慧瑾%郑晓晶%张伟锋%边晔%王东阳%赵俊丽%夏海滨
李慧瑾%鄭曉晶%張偉鋒%邊曄%王東暘%趙俊麗%夏海濱
리혜근%정효정%장위봉%변엽%왕동양%조준려%하해빈
小干扰RNA%载体%基因沉默%微小RNA
小榦擾RNA%載體%基因沉默%微小RNA
소간우RNA%재체%기인침묵%미소RNA
目的:用mir30前体骨架来构建高效表达小干扰RNA载体.方法:通过基因合成的方法,将mir30前体骨架进行全长基因合成,并在合成的mir30前体骨架中引入合适的酶切位点用于外源发夹DNA的克隆,然后将之克隆到含U6启动子的表达载体中.将针对绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的小干扰RNA克隆到以上表达载体中,通过转染及Western blot来检测新的小干扰RNA表达载体的基因沉默效率.结果:同目前常用的含polⅢ的小干扰RNA表达载体相比较,用mir30前体骨架表达针对GFP的小干扰RNA的表达载体可以明显抑制GFP的表达.结论:用mir30前体骨架构建的小干扰RNA表达载体可高效表达外源小干扰RNA.
目的:用mir30前體骨架來構建高效錶達小榦擾RNA載體.方法:通過基因閤成的方法,將mir30前體骨架進行全長基因閤成,併在閤成的mir30前體骨架中引入閤適的酶切位點用于外源髮夾DNA的剋隆,然後將之剋隆到含U6啟動子的錶達載體中.將針對綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的小榦擾RNA剋隆到以上錶達載體中,通過轉染及Western blot來檢測新的小榦擾RNA錶達載體的基因沉默效率.結果:同目前常用的含polⅢ的小榦擾RNA錶達載體相比較,用mir30前體骨架錶達針對GFP的小榦擾RNA的錶達載體可以明顯抑製GFP的錶達.結論:用mir30前體骨架構建的小榦擾RNA錶達載體可高效錶達外源小榦擾RNA.
목적:용mir30전체골가래구건고효표체소간우RNA재체.방법:통과기인합성적방법,장mir30전체골가진행전장기인합성,병재합성적mir30전체골가중인입합괄적매절위점용우외원발협DNA적극륭,연후장지극륭도함U6계동자적표체재체중.장침대록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)적소간우RNA극륭도이상표체재체중,통과전염급Western blot래검측신적소간우RNA표체재체적기인침묵효솔.결과:동목전상용적함polⅢ적소간우RNA표체재체상비교,용mir30전체골가표체침대GFP적소간우RNA적표체재체가이명현억제GFP적표체.결론:용mir30전체골가구건적소간우RNA표체재체가고효표체외원소간우RNA.
