分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2007年
11期
1541-1547
,共7页
石根%唐宝军%王栩%赵利霞%林金明
石根%唐寶軍%王栩%趙利霞%林金明
석근%당보군%왕허%조리하%림금명
游离前列腺特异抗原%前列腺癌%化学发光酶免疫分析%肿瘤标志物
遊離前列腺特異抗原%前列腺癌%化學髮光酶免疫分析%腫瘤標誌物
유리전렬선특이항원%전렬선암%화학발광매면역분석%종류표지물
建立了一种定量分析人血清中游离前列腺特异性抗原(f-PSA)的高灵敏度微孔板化学发光酶免疫分析方法,以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为标记酶,4-甲氧基4-(3〃-磷酰氧基苯)-螺旋-(1,2-二氧杂环丁烷-3,2'-金刚烷)(4-methoxy-4-(3〃-phosphate-phenyl)-spiro-(1,2-dioxetane-3,2'-adamantane),AMPPD)-ALP高灵敏的化学发光反应为检测体系,通过检测发光强度对人血清中f-PSA进行定量.对几种物理化学参数如温育时间、免疫反应步骤以及检测时间等进行了优化,采用了一步双抗体夹心法,37℃恒温静置温育2 h,洗涤后加入50 μL AMPPD,30~80 min内检测.该方法线性范围为0.15~20μg/L,相关系数大于0.998;检出限可达0.01μg/L,批内和批间相对标准偏差(C.V.)均小于7%;回收率在88%~108%之间.对人体血清中共存的6种常见肿瘤标志物CA50、CA125、CA15-3、CA242、CEA和AFP的偶联反应进行考察,特异性良好.为了验证该方法用于商业试剂盒的可行性,在4℃和37℃条件下分别进行了3 d,5 d,7 d的稳定性考察,其线性相关系数仍均大于0.998,相对标准偏差小于6%.对98例实际血样进行测定,并与进口试剂盒(Monobind.USA)作临床比对,相关性良好.这些结果均表明,该分析体系稳定,可靠,可以用于商业化试剂盒的开发,在临床分析人血清中f-PSA的辅助诊断前列腺癌方面具有很高的应用价值.
建立瞭一種定量分析人血清中遊離前列腺特異性抗原(f-PSA)的高靈敏度微孔闆化學髮光酶免疫分析方法,以堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,ALP)為標記酶,4-甲氧基4-(3〃-燐酰氧基苯)-螺鏇-(1,2-二氧雜環丁烷-3,2'-金剛烷)(4-methoxy-4-(3〃-phosphate-phenyl)-spiro-(1,2-dioxetane-3,2'-adamantane),AMPPD)-ALP高靈敏的化學髮光反應為檢測體繫,通過檢測髮光彊度對人血清中f-PSA進行定量.對幾種物理化學參數如溫育時間、免疫反應步驟以及檢測時間等進行瞭優化,採用瞭一步雙抗體夾心法,37℃恆溫靜置溫育2 h,洗滌後加入50 μL AMPPD,30~80 min內檢測.該方法線性範圍為0.15~20μg/L,相關繫數大于0.998;檢齣限可達0.01μg/L,批內和批間相對標準偏差(C.V.)均小于7%;迴收率在88%~108%之間.對人體血清中共存的6種常見腫瘤標誌物CA50、CA125、CA15-3、CA242、CEA和AFP的偶聯反應進行攷察,特異性良好.為瞭驗證該方法用于商業試劑盒的可行性,在4℃和37℃條件下分彆進行瞭3 d,5 d,7 d的穩定性攷察,其線性相關繫數仍均大于0.998,相對標準偏差小于6%.對98例實際血樣進行測定,併與進口試劑盒(Monobind.USA)作臨床比對,相關性良好.這些結果均錶明,該分析體繫穩定,可靠,可以用于商業化試劑盒的開髮,在臨床分析人血清中f-PSA的輔助診斷前列腺癌方麵具有很高的應用價值.
건립료일충정량분석인혈청중유리전렬선특이성항원(f-PSA)적고령민도미공판화학발광매면역분석방법,이감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)위표기매,4-갑양기4-(3〃-린선양기분)-라선-(1,2-이양잡배정완-3,2'-금강완)(4-methoxy-4-(3〃-phosphate-phenyl)-spiro-(1,2-dioxetane-3,2'-adamantane),AMPPD)-ALP고령민적화학발광반응위검측체계,통과검측발광강도대인혈청중f-PSA진행정량.대궤충물이화학삼수여온육시간、면역반응보취이급검측시간등진행료우화,채용료일보쌍항체협심법,37℃항온정치온육2 h,세조후가입50 μL AMPPD,30~80 min내검측.해방법선성범위위0.15~20μg/L,상관계수대우0.998;검출한가체0.01μg/L,비내화비간상대표준편차(C.V.)균소우7%;회수솔재88%~108%지간.대인체혈청중공존적6충상견종류표지물CA50、CA125、CA15-3、CA242、CEA화AFP적우련반응진행고찰,특이성량호.위료험증해방법용우상업시제합적가행성,재4℃화37℃조건하분별진행료3 d,5 d,7 d적은정성고찰,기선성상관계수잉균대우0.998,상대표준편차소우6%.대98례실제혈양진행측정,병여진구시제합(Monobind.USA)작림상비대,상관성량호.저사결과균표명,해분석체계은정,가고,가이용우상업화시제합적개발,재림상분석인혈청중f-PSA적보조진단전렬선암방면구유흔고적응용개치.